本文關(guān)鍵詞：平面雙分子層脂質(zhì)膜上人工重建大電導(dǎo)鈣激活鉀通道　出處：《生理學(xué)報》2017年03期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：本研究旨在探索建立一種穩(wěn)定平面雙分子層脂質(zhì)膜(planar lipid bilayer membranes,PLBMs)的制備方法,并嘗試將大電導(dǎo)鈣激活鉀通道(large conductance calcium-activated potassium channel,BK_(Ca))蛋白融合其上進(jìn)行單通道電流研究。將卵磷脂與膽固醇氯仿按3:1比例混合,用N_2吹干氯仿,制成癸烷脂質(zhì)液,采用涂抹法制備PLBMs,并將BK_(Ca)重建到PLBMs上,用膜片鉗研究其單通道特性。結(jié)果顯示,重建到PLBMs上的BK_(Ca)的單通道的電導(dǎo)值為(206.8±16.9)pS,當(dāng)浴液中[Ca~(2+)]=0μmol/L時,無論超極化或去極化狀態(tài)下均很少見到BK_(Ca)的通道活動。膜電位為+40 m V時,當(dāng)[Ca~(2+)]由1μmol/L增加到100μmol/L時,通道開放概率由0.034±0.002增加到0.961±0.013,平均開放時間由(1.1±0.2)ms延長到(151.3±10.2)ms,平均關(guān)閉時間由(32.2±2.8)ms縮短為(2.1±1.8)ms;當(dāng)K+濃度為40/140 mmol/L(Cis/Trans)時,重建的BK_(Ca)反轉(zhuǎn)電位在-30 mV左右。以上結(jié)果提示:(1)涂抹法可用于PLBMs的制備;(2)重建后的BK_(Ca)通道具有電導(dǎo)值大、電壓依賴性、Ca~(2+)敏感性和K~+選擇性;(3)PLBMs技術(shù)可用于BK_(Ca)通道的藥理學(xué)和動力學(xué)特性的研究。
[Abstract]:The results showed that the conductivity of BK _ ( Ca ) was increased from 0 . 34 鹵 0 . 002 to 0 . 961 鹵 0 . 013 . When K + concentration was 40 / 140 mmol / L ( cis / Trans ) , the open probability of channel was increased from 0 . 34 鹵 0 . 002 to 0 . 961 鹵 0 . 013 .

【作者單位】： 西南醫(yī)科大學(xué)心血管醫(yī)學(xué)研究所心血管疾病預(yù)防和治療協(xié)同創(chuàng)新中心醫(yī)學(xué)電生理學(xué)教育部重點實驗室;
【基金】：supported by the National Natural Science Foundation of China(No.81173661) Joint Grant of Luzhou Municipality and Luzhou Medical College,Sichuan Province,China(No.2013LZLY-J05)
【分類號】：R3411
【正文快照】： This work was supported by the National Natural Science Foundation of China(No.81173661)and Joint Grant of Luzhou Munici-pality and Luzhou Medical College,Sichuan Province,China(No.2013LZLY-J05).在天然細(xì)胞上,有關(guān)大電導(dǎo)鈣激活鉀通道(largeconductance calciu

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本文編號：1371089