發(fā)布時(shí)間：2017-12-31 18:07

  本文關(guān)鍵詞：運(yùn)用酵母雙雜交系統(tǒng)篩選與埃博拉病毒GP、VP30、NP、L蛋白存在相互作用的宿主蛋白　出處：《軍事醫(yī)學(xué)》2017年04期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的運(yùn)用酵母雙雜交技術(shù)從人肝cDNA文庫(kù)中篩選出與埃博拉病毒(EBOV)GP、VP30、NP、L蛋白存在相互作用的宿主蛋白,用于研究GP、VP30、NP、L蛋白在EBOV傳染病中的生物學(xué)功能。方法利用重組PCR技術(shù)構(gòu)建誘餌質(zhì)粒pGBKT7-GP、pGBKT7-VP30、pGBKT7-NP、pGBKT7-L,將誘餌菌株與人肝cDNA文庫(kù)菌株進(jìn)行雜交篩選,對(duì)篩選到的陽(yáng)性克隆進(jìn)行DNA測(cè)序和生物信息學(xué)分析,然后再利用酵母回復(fù)性實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步驗(yàn)證,排除假陽(yáng)性結(jié)果。結(jié)果成功構(gòu)建了誘餌質(zhì)粒pGBKT7-GP、pGBKT7-VP30、pGBKT7-NP、pGBKT7-L,篩選出6個(gè)可能與GP、VP30、NP、L蛋白有相互作用的宿主蛋白,分別是COMMD1、ALB、PSMD8、APOA2、CYP2E1、HP。酵母回復(fù)性實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說(shuō)明了COMMD1和APOA2與NP蛋白可能存在相互作用。結(jié)論酵母雙雜交篩選出多個(gè)可能與EBOV的GP、VP30、NP、L蛋白存在相互作用的捕獲蛋白,為研究EBOV的致病機(jī)制提供了參考。
[Abstract]:Objective to screen host proteins interacting with cDNA protein of Ebola virus (EBOV) in human liver by yeast two-hybrid technique, and to study GP. Methods the bait plasmid pGBKT7-GPPGBKT7-VP30 was constructed by recombinant PCR technique. PGBKT7-NPPGBKT7-L. the decoy strain was hybridized with human liver cDNA library strain, and the positive clones were sequenced by DNA and bioinformatics analysis. Then the yeast reversibility experiment was used to further verify and exclude the false positive results. Results the bait plasmid pGBKT7-GPPGBKT7-VP30 pGBKT7-NP was successfully constructed. PGBKT7-L. six host proteins, which may interact with the protein of GPV VP30, were identified as COMMD1, ALB, PSMD8 and APOA2, respectively. CYP2E1. Yeast reversibility test further showed that COMMD1 and APOA2 may interact with NP protein. Conclusion yeast two-hybrid screening of multiple GPVP30 which may be associated with EBOV. NPL protein has interacted capture protein, which provides a reference for studying the pathogenesis of EBOV.
【作者單位】： 安徽大學(xué)健康科學(xué)研究院;軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院生物工程研究所;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金應(yīng)急管理資助項(xiàng)目(81550001);國(guó)家自然科學(xué)基金重大資助項(xiàng)目(81590766) 病原微生物生物安全國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室開放研究基金資助項(xiàng)目(SKLPBS1507)
【分類號(hào)】：R373
【正文快照】： 埃博拉病毒(Ebola virus,EBOV)屬于絲狀病毒科埃博拉病毒屬,在1976年首次發(fā)現(xiàn)于蘇丹的恩扎拉和剛果(金)(舊稱扎伊爾)的埃博拉河地區(qū)[1]。2014年2月,西非暴發(fā)了最近一次的EBOV疫情,再次引起廣泛關(guān)注。EBOV能引起嚴(yán)重的出血熱癥狀,對(duì)人類以及其他靈長(zhǎng)類動(dòng)物都是致命的[2]。在感

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3 孫玉蘭,李德新;埃博拉病毒結(jié)構(gòu)蛋白研究進(jìn)展[J];中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志;2004年04期

4 ;干擾埃博拉病毒繁殖突破性進(jìn)展[J];臨床合理用藥雜志;2010年12期

5 ;美科學(xué)家揭開埃博拉病毒之謎[J];生物學(xué)教學(xué);2014年01期

6 ;何謂埃博拉病毒[J];山西教育;2001年10期

7 李瀟;埃博拉病毒糖蛋白致命之謎[J];生物化學(xué)與生物物理學(xué)報(bào);2001年01期

8 聶福平;范泉水;王靈強(qiáng);郄翠仙;郭松輝;龍貴偉;李麗紅;張念祖;;埃博拉病毒的研究進(jìn)展[J];中國(guó)畜牧獸醫(yī);2006年10期

9 王雪敏;王皓婷;邱亞峰;史子學(xué);邵東華;王水明;劉學(xué)輝;王志亮;馬志永;;埃博拉病毒科特迪瓦型核蛋白的原核表達(dá)及純化[J];中國(guó)人獸共患病學(xué)報(bào);2011年07期

10 石明;沈宇清;;埃博拉病毒侵染細(xì)胞機(jī)制的研究進(jìn)展[J];病毒學(xué)報(bào);2013年01期

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1 ;美研究人員發(fā)現(xiàn)豬感染埃博拉病毒[N];新華每日電訊;2009年

2 王雯婷;埃博拉病毒扯動(dòng)世界[N];人民日?qǐng)?bào)海外版;2014年

3 杜鵑;埃博拉病毒六問[N];新華每日電訊;2014年

4 本報(bào)記者 吳越;氣候因素催生埃博拉病毒？[N];中國(guó)氣象報(bào);2014年

5 記者 王玉鳳;埃博拉病毒“復(fù)活” 全球嚴(yán)防[N];第一財(cái)經(jīng)日?qǐng)?bào);2014年

6 張忠霞;埃博拉病毒為何難降服[N];健康報(bào);2014年

7 徐蔚冰;埃博拉病毒離我們有多遠(yuǎn)[N];中國(guó)經(jīng)濟(jì)時(shí)報(bào);2014年

8 張?zhí)锟?埃博拉病毒的“零藥物”之憂[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2014年

9 編譯 許關(guān)煜;激戰(zhàn)埃博拉病毒[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2014年

10 孔嬌;正確看待“埃博拉病毒”[N];中國(guó)保險(xiǎn)報(bào);2014年

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2 蓋微微;致死型埃博拉病毒核酸和抗體檢測(cè)方法的建立[D];吉林農(nóng)業(yè)大學(xué);2014年

3 趙晨;埃博拉病毒糖蛋白的毒性研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

4 張桂根;埃博拉病毒包膜蛋白GP細(xì)胞毒性機(jī)理研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2011年

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本文編號(hào)：1360865