本文關(guān)鍵詞：大鼠器官型腦片的培養(yǎng)　出處：《河北醫(yī)科大學(xué)》2011年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

  更多相關(guān)文章： 器官型腦片 培養(yǎng) 微孔膜 MEM SD大鼠 大錐體細胞 SMI-32

【摘要】：目的:建立大鼠正常器官型培養(yǎng)腦片模型,并對器官型腦片中的大錐體細胞進行鑒定。器官型腦片培養(yǎng)成功后,可在此基礎(chǔ)上建立各種疾病的器官型腦片模型,探討疾病的發(fā)生發(fā)展機制及規(guī)律。 方法:本實驗應(yīng)用millicell-CM insert微孔膜插入式培養(yǎng)技術(shù)以及由最小培養(yǎng)基MEM,馬血清,Hanks’液組成的培養(yǎng)液成功培養(yǎng)了大鼠器官型腦片,并用抗非磷酸化神經(jīng)微絲單克隆抗體(SMI-32單克隆抗體)進行免疫組化染色,對器官型腦片和在體腦組織的大錐體細胞進行鑒定,根據(jù)在體腦皮層的大錐體細胞對器官型腦片的大錐體細胞進行定位及形態(tài)比較,在200×鏡下測定3個隨機視野中5 mm×5 mm目鏡測微尺面積下的SMI-32陽性大錐體細胞的數(shù)目,對培養(yǎng)兩周、三周、四周的腦片之間大錐體細胞計數(shù)并比較。 結(jié)果 1大鼠器官型培養(yǎng)腦片存活率達80%以上,可存活一個月以上。 2在體大腦皮層內(nèi),第V層細胞為大錐體細胞層,細胞胞體呈現(xiàn)多角形或者橢圓形,胞漿著色淺,有的呈空泡狀,樹突或不明顯,軸突較長,伸向皮層。 3培養(yǎng)腦片中,按照在體皮層大椎體細胞所分布的位置,可見在大腦皮層深部,第V層細胞呈錐體形或者多角形,胞體直徑25~50μm,每個細胞的胞體顏色均一,胞漿著色深,樹突明顯,都有一個長的軸突伸向皮層,軸突較長。隨著培養(yǎng)時間的延長,細胞的橫向突起增長變多。 4培養(yǎng)2、3、4周的腦片中的大錐體細胞計數(shù)分別為28.50±4.34、27.83±4.40、27.67±3.55,各時點皮層錐體細胞計數(shù)無顯著差異(P0.05)。 結(jié)論:本實驗應(yīng)用millicell-CM insert微孔膜插入式培養(yǎng)技術(shù)以及由最小培養(yǎng)基MEM,馬血清,Hanks’液組成的培養(yǎng)液成功培養(yǎng)了大鼠器官型腦片,摸索并明確了其生長過程中對溫度、培養(yǎng)液酸堿度、糖含量及氧氣濃度的要求,最佳培養(yǎng)環(huán)境條件為:37℃,培養(yǎng)液PH值為7.2-7.4,糖含量27.76g/L ,氣體配比為5%CO2+95%空氣,濕度為99%。培養(yǎng)周期為2周。用抗非磷酸化神經(jīng)微絲單克隆抗體(SMI-32單克隆抗體)對器官型腦片中的大錐體細胞進行鑒定,為缺氧缺糖器官型腦片、運動神經(jīng)元病、神經(jīng)變性病以及腦外傷性疾病器官型腦片模型的建立提供了堅實的科學(xué)基礎(chǔ)。
[Abstract]:......
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2011
【分類號】：R329

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前4條

1 肖向建,劉衛(wèi)剛,馬征,李敏,李春巖;大鼠運動區(qū)腦片培養(yǎng)及皮層錐體細胞的組化鑒定[J];腦與神經(jīng)疾病雜志;2005年01期

2 劉思蘭,王志萍,曾因明,江山,于常州,汪曙渠;低溫對大鼠海馬腦片缺氧無糖損傷的保護作用及其機制[J];中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志;2004年02期

3 嚴樂勤,魏爾清,胡海濤,張緯萍,王夢令,沈建中;一種定量評價離體海馬腦片缺糖/缺氧損傷的新方法[J];浙江大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2002年02期

4 王玉凱,劉焯霖,陶恩祥,徐嚴明,李寶琴,寧玉萍;Wistar乳鼠中腦黑質(zhì)器官型腦片的培養(yǎng)[J];中山醫(yī)科大學(xué)學(xué)報;2002年03期

，

本文編號：1350541