本文關(guān)鍵詞：質(zhì)譜法分析旋毛蟲肌幼蟲排泄分泌蛋白的組分　出處：《中國寄生蟲學(xué)與寄生蟲病雜志》2016年01期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的分析旋毛蟲(Trichinella spiralis)肌幼蟲排泄分泌蛋白(excretory-secretory protein,ESP)的組分,尋找其抗腫瘤活性組分。方法收集純凈的旋毛蟲脫囊肌幼蟲,制備旋毛蟲肌幼蟲ESP。采用15%十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳(SDS-PAGE)分離ESP,將分離獲得的所有蛋白條帶進(jìn)行胰蛋白酶酶解,采用液質(zhì)聯(lián)用質(zhì)譜法(LC-MS/MS)進(jìn)行鑒定。利用Gene Ontology(GO)對已鑒定蛋白質(zhì)進(jìn)行細(xì)胞組分、分子功能和生物過程的富集分析。結(jié)果經(jīng)SDS-PAGE電泳分離獲得清晰的蛋白質(zhì)條帶,相對分子質(zhì)量(Mr)為10 000~142 000。質(zhì)譜分析共鑒定出162種蛋白質(zhì),其中63種為已明確鑒定的蛋白質(zhì),34種為假定蛋白質(zhì),65種為未鑒定的蛋白質(zhì)。鑒定出6種與抗腫瘤相關(guān)的蛋白質(zhì),即原肌球蛋白、組蛋白H2A、剪切聚腺苷酸化特異因子亞基2、Kazal 4型絲氨酸蛋白酶抑制劑、犰狳極性蛋白和真核起始因子4A。GO富集分析顯示,已鑒定的蛋白質(zhì)具有54種不同的分子功能,參與細(xì)胞構(gòu)成并參與382種生物過程。結(jié)論旋毛蟲肌幼蟲ESP組分復(fù)雜,有多種未鑒定的蛋白質(zhì),從已知的63種蛋白質(zhì)中篩選出6種與抗腫瘤相關(guān)的蛋白質(zhì)。
【作者單位】： 承德醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室;承德醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室;承德石油高等�？茖W(xué)校機(jī)械工程系;
【基金】：河北省教育廳資助重點項目(No.ZD2014049)~~
【分類號】：R383.15
【正文快照】： 按照來源部位的不同,旋毛蟲(Trichinella500 U/ml青鏈霉素的RPMI 1640培養(yǎng)液中,37℃、spiralis)蛋白可分為表面蛋白、蟲體可溶性蛋白和5%CO2、飽和濕度條件下培養(yǎng)24 h。選取蟲體活排泄分泌蛋白(excretory-secretory protein,ESP)[1]。躍、死蟲率5%的培養(yǎng)皿,將培養(yǎng)液于4℃、12

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本文編號：1321307