本文關(guān)鍵詞：犬博卡病毒結(jié)構(gòu)基因VP2多克隆抗體的制備與應(yīng)用　出處：《細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志》2016年02期 　論文類型：期刊論文

  更多相關(guān)文章： 犬博卡病毒(CBV) 結(jié)構(gòu)基因VP 多克隆抗體

【摘要】：目的構(gòu)建犬博卡病毒(CBV)結(jié)構(gòu)蛋白VP2的兔抗VP2多克隆抗體并進(jìn)行特異性鑒定。方法應(yīng)用PCR方法擴(kuò)增獲得CBV結(jié)構(gòu)蛋白VP2 C末端區(qū)域300個(gè)氨基酸所對(duì)應(yīng)的基因片段。經(jīng)雙酶切和測(cè)序分析后,連接到原核表達(dá)載體p ET-32a(+),構(gòu)建重組質(zhì)粒p ET-32a(+)-VP2,轉(zhuǎn)化至E.coli BL21中,異丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物SDS-PAGE分析鑒定;純化融合蛋白后免疫新西蘭家兔,制備多克隆抗體,檢測(cè)抗體效價(jià)及特異性。結(jié)果通過(guò)酶切和測(cè)序證實(shí)成功構(gòu)建原核表達(dá)載體p ET-32a(+)-VP2,轉(zhuǎn)化后可以成功誘導(dǎo)并純化出大小與預(yù)期一致的蛋白;制備的多克隆抗體經(jīng)ELISA檢測(cè)效價(jià)達(dá)到1∶6 400 000,Western blot法及免疫熒光染色鑒定抗體的特異性。結(jié)論成功制備了抗CBV結(jié)構(gòu)蛋白VP2的多克隆抗體。
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)與分子生物學(xué)系;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81260247) 寧夏高等學(xué)�？茖W(xué)技術(shù)研究項(xiàng)目(2002260503)
【分類號(hào)】：R392.11
【正文快照】： 犬博卡病毒(canine bocavirus,CBV)即(minutevirus of canine,MVC)的感染與呼吸道及腸道急性感染性疾病關(guān)系密切。在博卡病毒家族中,除CBV外,還有牛博卡病毒(bovine parvovirus,BPV)、人博卡病毒(human bocavirus,HBo V)以及在黑猩猩、海獅、豬等動(dòng)物體內(nèi)新發(fā)現(xiàn)的博卡病毒家族

【相似文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 羅迪賢;劉巧突;林應(yīng)標(biāo);戴國(guó)知;夏承來(lái);何志雄;張治明;許燦新;廖端芳;;人類博卡病毒基因組序列與進(jìn)化分析[J];實(shí)用預(yù)防醫(yī)學(xué);2006年06期

2 林峰;;人博卡病毒感染的研究進(jìn)展[J];病毒學(xué)報(bào);2007年02期

3 傅希;伍嚴(yán)安;;博卡病毒的研究進(jìn)展[J];醫(yī)學(xué)綜述;2007年15期

4 嚴(yán)華杰;盛軍;董蔚;管麗華;王蔚;王凱;任培君;邵潔;;上海嘉定地區(qū)連續(xù)3年兒童人博卡病毒感染的研究[J];臨床兒科雜志;2010年06期

5 陳倩;胡正;;人博卡病毒的研究進(jìn)展[J];中國(guó)當(dāng)代兒科雜志;2010年08期

6 李建寧;姚青;孫玉寧;;博卡病毒屬基因組特征與致病的分子機(jī)制[J];微生物學(xué)報(bào);2013年05期

7 何濤君;王瓊;何英;黃烈;張銀輝;林廣裕;陸學(xué)東;;采用半巢式PCR技術(shù)從臨床標(biāo)本中克隆人類博卡病毒的全基因[J];國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志;2014年01期

8 林峰;曾愛(ài)平;楊寧敏;林海燕;鄭昌華;李樺;陳弘;李旭陽(yáng);郁明素;楊寶順;金大智;;小兒人博卡病毒感染臨床與實(shí)驗(yàn)研究[J];醫(yī)學(xué)研究雜志;2006年09期

9 黃頭華;;我國(guó)醫(yī)學(xué)界首次發(fā)現(xiàn)人類博卡病毒[J];中國(guó)醫(yī)藥指南;2006年09期

10 鄭敏巧;林峰;鄭美云;陳弘;曾愛(ài)平;吳峰;;人博卡病毒母嬰感染的臨床前瞻性研究[J];中華實(shí)驗(yàn)和臨床病毒學(xué)雜志;2007年04期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 曹虹;彭亮;;新型微小病毒——人類博卡病毒[A];新發(fā)和再發(fā)傳染病防治熱點(diǎn)研討會(huì)論文集[C];2009年

2 林峰;曾愛(ài)平;楊寧敏;林海燕;鄭昌華;李樺;陳弘;李旭陽(yáng);郁明素;金大智;王升啟;;小兒博卡病毒感染的臨床與實(shí)驗(yàn)研究[A];2006（第三屆）江浙滬兒科學(xué)術(shù)會(huì)議暨浙江省兒科學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

3 林峰;曾愛(ài)平;林海燕;鄭昌華;李樺;陳弘;李旭陽(yáng);郁明素;楊寧敏;金大智;王升啟;;小兒博卡病毒感染的臨床與實(shí)驗(yàn)研究[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十四次全國(guó)兒科學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2006年

4 陸學(xué)東;林廣裕;周仁彬;王瓊;林創(chuàng)興;楊來(lái)智;陸長(zhǎng)東;;廣東地區(qū)首例人博卡病毒的檢出及鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議資料匯編[C];2008年

5 王婷;李昌崇;陳小芳;聶穎;崇蕾;;溫州地區(qū)人博卡病毒在急性喘息患兒中的檢測(cè)及其病毒載量與疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)分析[A];2012年江浙滬兒科學(xué)術(shù)年會(huì)暨浙江省醫(yī)學(xué)會(huì)兒科學(xué)分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)、兒內(nèi)科疾病診治新進(jìn)展國(guó)家級(jí)學(xué)習(xí)班論文匯編[C];2012年

6 林峰;;人博卡病毒感染支氣管上皮細(xì)胞的生物學(xué)特征研究[A];2008年浙江省兒科學(xué)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

7 王婷;李昌崇;陳小芳;聶穎;崇蕾;;溫州地區(qū)人博卡病毒在急性喘息患兒中的檢出及其病毒載量與疾病嚴(yán)重程度的相關(guān)分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十三屆全國(guó)兒科呼吸學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2012年

8 李芳;孫玉寧;張茜;蘆曉紅;;博卡病毒MVC在不同種屬細(xì)胞系病毒基因組復(fù)制及感染特性分析[A];中國(guó)的遺傳學(xué)研究——遺傳學(xué)進(jìn)步推動(dòng)中國(guó)西部經(jīng)濟(jì)與社會(huì)發(fā)展——2011年中國(guó)遺傳學(xué)會(huì)大會(huì)論文摘要匯編[C];2011年

9 何彪;楊凡力;涂長(zhǎng)春;;中國(guó)蝙蝠病毒宏基因組學(xué)研究[A];中國(guó)畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)獸醫(yī)公共衛(wèi)生學(xué)分會(huì)第三次學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2012年

10 王維;林書(shū)祥;黃敬孚;徐曉華;;天津地區(qū)嬰幼兒腹瀉博卡病毒的檢出及鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第十七次全國(guó)兒科學(xué)術(shù)大會(huì)論文匯編（上冊(cè)）[C];2012年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前8條

1 記者　 鄧明 通訊員　 白培生 劉巧突;郴州在國(guó)內(nèi)首次發(fā)現(xiàn)人類博卡病毒[N];湖南日?qǐng)?bào);2006年

2 記者 吳德群;口岸連查4宗 人感染博卡病毒[N];深圳特區(qū)報(bào);2012年

3 陳茂j 趙斌;溫嶺市一院在我國(guó)首次發(fā)現(xiàn)人博卡病毒[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2006年

4 記者 王理略 通訊員 任麗瓊;首次克隆出人博卡病毒全基因組[N];湖北日?qǐng)?bào);2014年

5 貴州大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院 郝飛 湯德元;豬博卡病毒研究進(jìn)展[N];河北科技報(bào);2012年

6 記者　 龍軍;我國(guó)首次發(fā)現(xiàn)人類博卡病毒HBoV[N];光明日?qǐng)?bào);2006年

7 洪衛(wèi) 張敏;迎接照耀醫(yī)學(xué)高峰的新曙光[N];浙江日?qǐng)?bào);2006年

8 何彪 沈基飛;我學(xué)者發(fā)現(xiàn)新型SARS樣冠狀病毒[N];健康報(bào);2014年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 程衛(wèi)霞;博卡病毒流行病學(xué)、致病性及基因進(jìn)化研究[D];蘭州大學(xué);2011年

2 趙慧;兒童腹瀉相關(guān)的人博卡病毒2型的初步研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

3 鄧雪鋒;人類博卡病毒感染性克隆的構(gòu)建及體外感染模型的研究[D];華中師范大學(xué);2013年

4 李京京;人類博卡病毒HBoV1基因組克隆及轉(zhuǎn)錄、翻譯分子機(jī)制研究[D];華中師范大學(xué);2012年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 馬均;兒童急性呼吸道感染人博卡病毒檢測(cè)及分析[D];吉林大學(xué);2009年

2 梁丹丹;小兒呼吸道人類博卡病毒感染免疫致病機(jī)制的初步研究[D];汕頭大學(xué);2011年

3 楊晚竹;豬博卡病毒分子生物學(xué)特征及感染性克隆構(gòu)建的初步探索[D];中國(guó)疾病預(yù)防控制中心;2012年

4 漆正宇;我國(guó)人博卡病毒的分子流行病學(xué)及衣殼蛋白獨(dú)有區(qū)表達(dá)純化的研究[D];貴州大學(xué);2007年

5 韓虎;人博卡病毒結(jié)構(gòu)蛋白與非結(jié)構(gòu)蛋白功能的初步研究[D];華中師范大學(xué);2012年

6 李紅學(xué);人博卡病毒在健康獻(xiàn)漿人群中的基因組和血清學(xué)抗體流行情況研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2014年

7 丁媛;重慶地區(qū)兒童呼吸道博卡病毒感染特點(diǎn)[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2007年

8 周瓊?cè)A;人博卡病毒在急性下呼吸道感染住院兒童中的現(xiàn)狀分析[D];湖南師范大學(xué);2011年

9 張宏彪;豬博卡病毒在我國(guó)部分地區(qū)的分子流行病學(xué)調(diào)查及其熒光定量PCR方法的建立與應(yīng)用[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2012年

10 李玲;不同檢測(cè)方法在兒童急性下呼吸道人博卡病毒感染診斷中的應(yīng)用[D];蘇州大學(xué);2014年

，

本文編號(hào)：1314593