本文關鍵詞：犬博卡病毒結構基因VP2多克隆抗體的制備與應用　出處：《細胞與分子免疫學雜志》2016年02期 　論文類型：期刊論文

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【摘要】：目的構建犬博卡病毒(CBV)結構蛋白VP2的兔抗VP2多克隆抗體并進行特異性鑒定。方法應用PCR方法擴增獲得CBV結構蛋白VP2 C末端區(qū)域300個氨基酸所對應的基因片段。經雙酶切和測序分析后,連接到原核表達載體p ET-32a(+),構建重組質粒p ET-32a(+)-VP2,轉化至E.coli BL21中,異丙基硫代β-D-半乳糖苷(IPTG)誘導表達,表達產物SDS-PAGE分析鑒定;純化融合蛋白后免疫新西蘭家兔,制備多克隆抗體,檢測抗體效價及特異性。結果通過酶切和測序證實成功構建原核表達載體p ET-32a(+)-VP2,轉化后可以成功誘導并純化出大小與預期一致的蛋白;制備的多克隆抗體經ELISA檢測效價達到1∶6 400 000,Western blot法及免疫熒光染色鑒定抗體的特異性。結論成功制備了抗CBV結構蛋白VP2的多克隆抗體。
【作者單位】： 寧夏醫(yī)科大學基礎醫(yī)學院生物化學與分子生物學系;
【基金】：國家自然科學基金(81260247) 寧夏高等學校科學技術研究項目(2002260503)
【分類號】：R392.11
【正文快照】： 犬博卡病毒(canine bocavirus,CBV)即(minutevirus of canine,MVC)的感染與呼吸道及腸道急性感染性疾病關系密切。在博卡病毒家族中,除CBV外,還有牛博卡病毒(bovine parvovirus,BPV)、人博卡病毒(human bocavirus,HBo V)以及在黑猩猩、海獅、豬等動物體內新發(fā)現(xiàn)的博卡病毒家族

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