小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞體外擴(kuò)增和分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞的實驗研究
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【摘要】:目的體外分離和擴(kuò)增小鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs),并觀察不同方法誘導(dǎo)BMSCs向神經(jīng)元樣細(xì)胞分化的差異,以尋找一種效果理想的BMSCs體外誘導(dǎo)方法。方法取昆明小鼠雙股骨骨髓,采用全骨髓貼壁法體外純化擴(kuò)增BMSCs,流式細(xì)胞術(shù)檢測其表面標(biāo)志物,并對其進(jìn)行成脂、成骨誘導(dǎo)鑒定。分別用化學(xué)誘導(dǎo)法和共培養(yǎng)法誘導(dǎo)BMSCs分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞,比較兩種方法所獲得的神經(jīng)元樣細(xì)胞的細(xì)胞形態(tài)。結(jié)果采用全骨髓貼壁法能有效分離小鼠BMSCs,隨著傳代次數(shù)的增加能得到逐漸純化的BMSCs,而過多的傳代次數(shù)則出現(xiàn)細(xì)胞生長速度緩慢、核固縮、脫離等衰老征象。流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果顯示P4代BMSCs陽性表達(dá)CD29和Sca-1,而陰性表達(dá)CD11b。具有成脂、成骨誘導(dǎo)分化的能力。共培養(yǎng)法誘導(dǎo)第5天可見神經(jīng)細(xì)胞樣形態(tài)且細(xì)胞突起數(shù)量較多并有分支;化學(xué)誘導(dǎo)法培養(yǎng)第7天細(xì)胞出現(xiàn)較長突起,形成神經(jīng)樣結(jié)構(gòu)。結(jié)論采用全骨髓貼壁法能有效分離純化小鼠BMSCs,通過共培養(yǎng)法誘導(dǎo)BMSCs分化為神經(jīng)元樣細(xì)胞效果優(yōu)于化學(xué)誘導(dǎo)法。
【作者單位】: 貴州醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院人體解剖學(xué)教研室;貴州醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院人體解剖學(xué)實驗中心;
【基金】:國家自然基金(81060108) 貴州省科技廳2012年社會發(fā)展攻關(guān)項目[黔科合SY字(2012)3153號]
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 長期以來,由于神經(jīng)元再生能力差,細(xì)胞受損后很難重建樹突和軸突之間的聯(lián)系,神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療是臨床上棘手的問題[1]。因此,尋找神經(jīng)元細(xì)胞的有效移植物對于神經(jīng)科學(xué)領(lǐng)域的發(fā)展具有重要意義。近年來,BMSCs作為理想的生物工程種子細(xì)胞因其具有多向分化潛能而備受關(guān)注,多項研究
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本文編號:1304628
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