單鏈DNA結(jié)合蛋白2對小鼠胚胎干細(xì)胞向滋養(yǎng)層方向分化的作用
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【摘要】:目的尋找并鑒定可促進(jìn)小鼠胚胎干細(xì)胞(ES細(xì)胞)向滋養(yǎng)層方向分化的新基因。方法優(yōu)化小鼠ES細(xì)胞向滋養(yǎng)層方向分化的誘導(dǎo)條件,結(jié)合數(shù)據(jù)分析尋找在此分化過程中表達(dá)上調(diào)的基因,由此發(fā)現(xiàn)了單鏈DNA結(jié)合蛋白2(Ssbp2)。通過qRT-PCR檢測Ssbp2在小鼠ES細(xì)胞向滋養(yǎng)層方向分化過程中的表達(dá)變化,并檢測Ssbp2在小鼠早期胚胎對應(yīng)的3種細(xì)胞類型中的表達(dá)模式?寺sbp2基因并將其在小鼠ES細(xì)胞中過表達(dá),觀察細(xì)胞形態(tài)并檢測其是否具有促進(jìn)小鼠ES細(xì)胞向滋養(yǎng)層方向分化的功能。結(jié)果通過嘗試不同的組合,發(fā)現(xiàn)在無血清的小鼠滋養(yǎng)層干細(xì)胞(TS細(xì)胞)基礎(chǔ)培養(yǎng)液中添加BMP4聯(lián)合b FGF既可誘導(dǎo)小鼠ES細(xì)胞中滋養(yǎng)層標(biāo)記基因的顯著上調(diào),又可有效抑制中胚層標(biāo)記基因的上調(diào)。通過表達(dá)模式分析發(fā)現(xiàn),在誘導(dǎo)小鼠ES細(xì)胞向滋養(yǎng)層方向分化過程中Ssbp2的表達(dá)量發(fā)生了顯著上調(diào),并且Ssbp2在TS細(xì)胞中高表達(dá)。當(dāng)在小鼠ES細(xì)胞中過表達(dá)Ssbp2之后,ES細(xì)胞發(fā)生了一定程度的分化,并且滋養(yǎng)層相關(guān)的標(biāo)記基因發(fā)生了最為顯著的上調(diào)。結(jié)論 Ssbp2具有促進(jìn)小鼠ES細(xì)胞向滋養(yǎng)層方向分化的作用。
【作者單位】: 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院分子發(fā)育生物學(xué)實驗室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31271456)~~
【分類號】:R321
【正文快照】: 小鼠胚胎第一次分化事件發(fā)生在早期囊胚階段,其結(jié)果是導(dǎo)致胚胎產(chǎn)生了兩種不同的細(xì)胞類群,即位于囊胚腔一端的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和位于囊胚外側(cè)的滋養(yǎng)層[1-2]。在體外培養(yǎng)條件下,內(nèi)細(xì)胞團(tuán)和滋養(yǎng)層又可分別形成具有自我更新能力的胚胎干細(xì)胞系(embryonic stem cell line,ES cell line)和
【相似文獻(xiàn)】
中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條
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8 黃t,
本文編號:1291372
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