本文關(guān)鍵詞：條件性血管瘤轉(zhuǎn)基因小鼠模型的建立

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【摘要】：目的:采用條件性轉(zhuǎn)基因策略構(gòu)建小鼠血管瘤動(dòng)物模型,并對(duì)其表型進(jìn)行鑒定。方法:構(gòu)建血管內(nèi)皮細(xì)胞特異性表達(dá)啟動(dòng)子Tie2驅(qū)動(dòng)的鼠多瘤病毒中間T基因(PyMT)表達(dá)質(zhì)粒(pTie2-PyMT),采用DNA顯微注射方法,將血管內(nèi)皮特異性表達(dá)的PyMT目的基因?qū)牍wC57BL/6J小鼠的雄原核中,再移植到假孕鼠的輸卵管中,產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因首建鼠。PCR方法檢測(cè)目的基因整合情況,檢查轉(zhuǎn)基因鼠基因型,觀察轉(zhuǎn)基因鼠表型,對(duì)于轉(zhuǎn)基因鼠出現(xiàn)的新生物進(jìn)行組織學(xué)及免疫組織化學(xué)檢測(cè)。采用Graph Pad Prism 5.0軟件包對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。結(jié)果:經(jīng)測(cè)序分析證實(shí),pTie2-PyMT質(zhì)粒中PyMT、Tie2啟動(dòng)子和Tie2增強(qiáng)子序列等組成元件被正確克隆、連接,且閱讀框正確。出生小鼠基因型經(jīng)PCR鑒定證實(shí),陽(yáng)性的轉(zhuǎn)基因小鼠均出現(xiàn)血管瘤樣新生物表型。血管瘤樣新生物主要表達(dá)部位在小鼠的耳、舌、皮膚、黏膜、肝等部位,組織學(xué)檢查證實(shí)為血管瘤樣病變,免疫組織化學(xué)方法證實(shí)新生物的內(nèi)皮細(xì)胞表達(dá)Py MT蛋白及血管內(nèi)皮標(biāo)志物CD31。結(jié)論:Tie2啟動(dòng)子驅(qū)動(dòng)下的PyMT基因可以在小鼠體內(nèi)誘發(fā)血管瘤,該模型鼠可用于血管瘤發(fā)病機(jī)制的研究。條件控制下的轉(zhuǎn)基因技術(shù)是一種有效的建立血管瘤動(dòng)物模型的方法。
【作者單位】： 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院口腔頜面-頭頸腫瘤科上海市口腔醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室·上海市口腔醫(yī)學(xué)研究所;上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第九人民醫(yī)院口腔病理科;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金面上項(xiàng)目(81070845) 上海市科委項(xiàng)目(12140901100)
【分類號(hào)】：R-332;R732.2
【正文快照】： 血管瘤是一種常見(jiàn)的嬰幼兒良性腫瘤,好發(fā)于頜面部,以具有快速增長(zhǎng)期和緩慢消退期為臨床特征。盡管部分嬰幼兒血管瘤具有自行消退的特點(diǎn),但是仍然有部分血管瘤不能自行消退,同時(shí)伴有出血、潰瘍形成等并發(fā)癥,重者可造成頜面部組織缺損和功能障礙,對(duì)患兒的身心健康產(chǎn)生嚴(yán)重影響[1

【相似文獻(xiàn)】

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1 江成鴻,莊福連,黃拔瑞,郭志輝,謝義德,周亞寬,王彪,陳文列;一種三維血管瘤血管生成體外培養(yǎng)模型的建立[J];中華整形外科雜志;2005年05期

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本文編號(hào)：1284403