發(fā)布時(shí)間：2017-12-12 17:23

  本文關(guān)鍵詞：乳鼠腦小膠質(zhì)細(xì)胞原代培養(yǎng)與鑒定

  更多相關(guān)文章： 大鼠 Sprague-Dawley 小膠質(zhì)細(xì)胞 培養(yǎng) 振搖法 純化 鑒定

【摘要】：目的:探索乳鼠小膠質(zhì)細(xì)胞的原代培養(yǎng)和鑒定方法。方法:取新生SD乳鼠腦組織搗碎、消化及共培養(yǎng),用振搖法分離純化小膠質(zhì)細(xì)胞并繼續(xù)培養(yǎng);在相差顯微鏡下觀察共培養(yǎng)第3、9及14天時(shí)細(xì)胞形態(tài),計(jì)數(shù)純化培養(yǎng)后小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)及存活率,采用免疫細(xì)胞化學(xué)染色方法在共聚焦顯微鏡下計(jì)數(shù)純化培養(yǎng)后小膠質(zhì)細(xì)胞特異性O(shè)X-42抗體表達(dá)陽性的細(xì)胞數(shù)及存活率,同時(shí)觀察小膠質(zhì)細(xì)胞活化形態(tài);觀察純化培養(yǎng)12、24、48及72 h后小膠質(zhì)細(xì)胞的靜止型細(xì)胞數(shù)和靜止率。結(jié)果:振搖法共培養(yǎng)第14天時(shí)可見胞體折光不均的星形膠質(zhì)細(xì)胞最多,分離時(shí)可獲得1.2×106個(gè)/瓶(75 cm2,250 m L)小膠質(zhì)細(xì)胞,免疫細(xì)胞化學(xué)染色顯示小膠質(zhì)細(xì)胞特異性O(shè)X-42表達(dá)陽性細(xì)胞達(dá)95%,存活率95%;在顯微鏡下小膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)以阿米巴樣、長梭形及馬鞍形為主;純化培養(yǎng)72 h后小膠質(zhì)細(xì)胞的靜止型細(xì)胞數(shù)和靜止率最高。結(jié)論:振搖法分離小膠質(zhì)細(xì)胞純化培養(yǎng)72 h,可獲得最高的靜止型小膠質(zhì)細(xì)胞數(shù)和靜止率。
【作者單位】： 貴州醫(yī)科大學(xué)急診醫(yī)學(xué)教研室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.81460185/H09106) 貴州省科技基金(2013-2043)
【分類號(hào)】：R329.2
【正文快照】： 小膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)主要的3種膠質(zhì)細(xì)胞之一,其數(shù)量約占總膠質(zhì)細(xì)胞總數(shù)的10%,是中樞神經(jīng)系統(tǒng)的免疫細(xì)胞,具有與外周巨噬細(xì)胞最相似的結(jié)構(gòu)和功能[1-2]。小膠質(zhì)細(xì)胞可通過釋放促炎或抗炎介質(zhì)對機(jī)體感染或損傷作出快速反應(yīng),影響疾病的發(fā)生發(fā)展[3]。因此建立一種在體外培養(yǎng)并

【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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10 薛e，

本文編號(hào)：1283319