本文關(guān)鍵詞：酸沉淀法純化14血清型肺炎鏈球菌莢膜多糖工藝的建立

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【摘要】：目的建立一種14血清型肺炎鏈球菌莢膜多糖的酸沉淀法純化工藝,以替代傳統(tǒng)的苯酚抽提法。方法對(duì)建立的14型肺炎鏈球菌莢膜多糖酸沉淀法中的氯化鈣終濃度(0、50、100、200、400 mmol/L)、p H值(3.5、4.0、4.5、5.0及5.7)及反應(yīng)時(shí)間(0、1、2、4、6、8 h及過夜)進(jìn)行優(yōu)化。采用優(yōu)化后的方法純化3批14型肺炎粗制多糖,制備精制多糖,并進(jìn)行理化指標(biāo)、抗原性檢測(cè)及核磁分析,同時(shí)與苯酚抽提純化工藝進(jìn)行比較。結(jié)果酸沉淀法的最佳工藝為:氯化鈣終濃度50~100 mmol/L,p H值3.5~4.0,作用時(shí)間為過夜。采用該方法制備的3批14型肺炎精制多糖的蛋白和核酸雜質(zhì)含量均較低,總磷、總氮、氨基己糖含量、多糖分子質(zhì)量均符合企業(yè)注冊(cè)標(biāo)準(zhǔn),抗原活性和核磁共振圖譜的分析結(jié)果表明其多糖結(jié)構(gòu)無異常。結(jié)論酸沉淀法具有操作簡(jiǎn)便、效果顯著及不需使用有毒有害試劑等優(yōu)點(diǎn),可用于純化14型肺炎鏈球菌莢膜多糖。
【作者單位】： 成都生物制品研究所有限責(zé)任公司;
【分類號(hào)】：R378.14
【正文快照】： 肺炎鏈球菌為革蘭陽性菌,是引發(fā)肺炎、腦膜炎、中耳炎、心內(nèi)膜炎等侵入性疾病的首要致病菌。肺炎莢膜多糖是肺炎鏈球菌的主要致病因子之一,具有良好的免疫原性和安全性[1-2]。目前,已發(fā)現(xiàn)約90個(gè)血清型的肺炎鏈球菌,其中23個(gè)血清型涵蓋了約90%的致病原。14型肺炎鏈球菌是其中最

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本文編號(hào)：1280682