霍亂弧菌DsbA蛋白通過增強(qiáng)MSHA的表達(dá)促進(jìn)生物被膜的形成
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【摘要】:【目的】闡明霍亂弧菌DsbA蛋白(VcDsbA)在生物被膜形成過程中的作用。【方法】采用Overlapping PCR的方法構(gòu)建VcdsbA基因敲除質(zhì)粒p MH524;采用同源重組和基因克隆的方法對霍亂弧菌dsbA(vc0034)基因進(jìn)行敲除和回補(bǔ);通過結(jié)晶紫染色實(shí)驗(yàn),比較野生株(WT)、dsbA突變株(ΔdsbA)和回補(bǔ)菌株(CΔdsbA)的生物被膜形成差異;用熒光素酶基因作為報(bào)告基因分析與生物被膜形成相關(guān)的甘露糖敏感血凝素纖毛合成蛋白(Mannose-sensitive hemagglutinin,pili biogenesis protein,MSHA)在霍亂弧菌WT、ΔdsbA和CΔdsbA中表達(dá)水平的區(qū)別。【結(jié)果】成功構(gòu)建霍亂弧菌dsbA基因缺失突變株和回補(bǔ)株;與WT相比,ΔdsbA生物被膜形成能力顯著下降,且msh操縱子的表達(dá)水平顯著降低�!窘Y(jié)論】VcDsbA可能通過影響其它調(diào)控因子直接或間接增強(qiáng)霍亂弧菌MSHA的生物合成,從而促進(jìn)霍亂弧菌生物被膜的形成。本文為進(jìn)一步研究DsbA在霍亂弧菌生物被膜形成中的調(diào)控機(jī)制奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】: 浙江農(nóng)林大學(xué)動(dòng)物科技學(xué)院;溫州科技職業(yè)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)系;
【基金】:國家自然科學(xué)基金(31300082,31470244) 浙江農(nóng)林大學(xué)科研發(fā)展基金(2013FR012) 浙江省2015年度高校國內(nèi)訪問學(xué)者專業(yè)發(fā)展項(xiàng)目(178)~~
【分類號】:R378.3
【正文快照】: 霍亂弧菌(Vibrio cholerae)是一種引起霍亂的革蘭氏陰性細(xì)菌。而霍亂是一種烈性腸道傳染病,被列為我國傳染病防治法規(guī)定的2種甲類傳染病之一,也是國際3種檢疫傳染性疾病中危害最為嚴(yán)重的一種[1 2]�;魜y弧菌在水生環(huán)境中通常以形成生物被膜的方式與水生環(huán)境中的浮游生物共生
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本文編號:1276226
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