發(fā)布時間：2017-12-10 21:33

  本文關(guān)鍵詞：低氧誘導(dǎo)因子-1α對KLF5表達調(diào)控的研究

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【摘要】：目的探索低氧誘導(dǎo)因子-1α(HIF-1α)對轉(zhuǎn)錄因子KLF5的表達調(diào)控及其在細胞增殖中的作用。方法用低氧(1%O_2或低氧模擬物CoCl_2)處理293T細胞,通過q PCR和Western blotting檢測HIF-1α、KLF5的m RNA和蛋白水平。用sh RNA抑制HIF-1α的表達,再用低氧處理293T細胞后檢測KLF5的表達水平。在293T細胞中過表達HIF-1α-P2A質(zhì)粒,然后檢測其對KLF5基因啟動子驅(qū)動的luciferase及KLF5表達水平的影響。在HIF-1α-P2A過表達的293T細胞轉(zhuǎn)染sh KLF5,通過CCK8檢測細胞的增殖情況。共同轉(zhuǎn)染KLF5和HRE-luciferase質(zhì)粒,通過熒光素酶報告系統(tǒng)檢測KLF5表達對HIF-1α轉(zhuǎn)錄活性的影響。結(jié)果 q PCR和Western blotting顯示低氧可以穩(wěn)定HIF-1α蛋白,同時在轉(zhuǎn)錄水平增強KLF5的表達;sh RNA抑制HIF-1α表達可以抑制低氧誘導(dǎo)的KLF5表達上調(diào),并且過表達外源性HIF-1α可以直接結(jié)合KLF5基因的啟動子區(qū)并上調(diào)KLF5的表達;盡管單獨過表達HIF-1α-P2A或者抑制KLF5的表達并不影響細胞增殖,但兩者同時存在時可以明顯促進細胞增殖;KLF5過表達可以明顯抑制HIF-1α的轉(zhuǎn)錄活性。結(jié)論 KLF5是HIF-1α的直接靶基因,HIF-1α在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控KLF5的表達,而KLF5可能通過抑制HIF-1α的轉(zhuǎn)錄活性從而抑制HIF-1α的促增殖作用。
【作者單位】： 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院病理生理學(xué)教研室細胞分化與凋亡教育部重點實驗室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81171888)~~
【分類號】：R363
【正文快照】： of H IF-1α.Conclusion KL F5 is the direct target gene of H IF-1αand H IF-1αtranscriptionally regulates theKL F5 expression.KL F5 m ay inhibit the H IF-1α-prom oted cell proliferation via suppressing the transcriptionalactivity of H IF-1α.氧是機體代

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