本文關(guān)鍵詞：大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化及破骨細(xì)胞培養(yǎng)方法的建立

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【摘要】：為建立穩(wěn)定的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化及破骨細(xì)胞培養(yǎng)的方法,為后續(xù)細(xì)胞共培養(yǎng)奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。采用通過全骨髓貼壁法體外分離、培養(yǎng)、純化大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的方法,進(jìn)行形態(tài)學(xué)觀察,并應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)檢測BMSCs免疫學(xué)表型,對其進(jìn)行鑒定;將獲得的第三代BMSCs向脂肪細(xì)胞和成骨細(xì)胞方向進(jìn)行誘導(dǎo)分化,誘導(dǎo)21 d后的脂肪細(xì)胞應(yīng)用油紅O染色進(jìn)行鑒定,成骨細(xì)胞應(yīng)用茜素紅染色進(jìn)行鑒定;將獲取的骨髓細(xì)胞液按照造血系單核干細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)法向破骨細(xì)胞方向進(jìn)行誘導(dǎo)分化,于28 d后進(jìn)行抗酒石酸酸性磷酸酶染色進(jìn)行鑒定。結(jié)果顯示,BMSCs體外培養(yǎng)14 d具有獨(dú)特的細(xì)胞免疫學(xué)表型,流式細(xì)胞術(shù)檢測,CD29+、CD44+表達(dá)量分別為97.92%和89.32%;在脂肪培養(yǎng)基誘導(dǎo)下,油紅O染色陽性。在成骨培養(yǎng)基誘導(dǎo)下,茜素紅染色陽性;骨髓細(xì)胞液在破骨培養(yǎng)基誘導(dǎo)下,抗酒石酸酸性磷酸酶染色陽性。由此可知,建立了穩(wěn)定的大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞向脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化及破骨細(xì)胞誘導(dǎo)分化的培養(yǎng)方法。
【作者單位】： 石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院/新疆地方病與民族高發(fā)病教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;石河子大學(xué)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(81360142)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymalstem cells,BMSCs)是Friedenstein等[1]首先在骨髓基質(zhì)間發(fā)現(xiàn)的來源于中胚層的一類具有自我更新及多向分化潛能的干細(xì)胞。有研究表明[2-5]BMSCs不同誘導(dǎo)條件下,可分化為脂肪、皮膚、成骨細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞、軟骨等,BMSCs有

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