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不同形式脊髓灰質(zhì)炎病毒顆粒的免疫原性

發(fā)布時間:2017-12-10 09:02

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【摘要】:目的評價不同形式的脊髓灰質(zhì)炎病毒(poliovirus,PV)顆粒的免疫原性。方法采用蔗糖密度梯度超速離心法分別將經(jīng)56℃加熱1.5 h處理和未經(jīng)加熱的PV進行分離純化,收集相應(yīng)組分,進行電鏡觀察及SDS-PAGE分析,并測定各組分的D抗原及蛋白含量。用不同PV顆粒組分分別免疫大鼠,均經(jīng)腿部肌肉注射,共接種3次,每次間隔21 d,于免疫前和第1、2次免疫后21 d經(jīng)眼眶采血,末次免疫后21 d經(jīng)心臟穿刺采血,分離血清,微量細胞病變(CPE)抑制法檢測血清中抗Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型PV中和抗體幾何平均滴度(GMT)。結(jié)果未經(jīng)加熱處理的PV可分離獲得EP(蔗糖濃度16%~19%)和FP(蔗糖濃度22%~24.5%)兩種病毒顆粒,電鏡觀察分別為空心顆粒和實心顆粒,EP經(jīng)SDS-PAGE分析可見VP0、VP1和VP3病毒蛋白條帶,FP可見VP1、VP2、VP3和VP4條帶;經(jīng)56℃加熱處理的PV可分離獲得HP(蔗糖濃度15%~17%)一種病毒顆粒,電鏡觀察為空心顆粒,SDS-PAGE分析可見VP0、VP1、VP2、VP3病毒蛋白條帶。EP、FP免疫大鼠后,均可誘導(dǎo)產(chǎn)生針對PV的中和抗體,但EP誘導(dǎo)產(chǎn)生的中和抗體GMT低于FP;HP不能誘導(dǎo)產(chǎn)生中和抗體。結(jié)論未經(jīng)加熱的PV可分離獲得EP和FP兩種病毒顆粒,均具有免疫原性;經(jīng)加熱處理的PV僅分離獲得HP一種病毒顆粒,不具有免疫原性。
【作者單位】: 北京生物制品研究所有限責(zé)任公司;
【基金】:重大新藥創(chuàng)制(2013ZX09402302) 中國國藥集團開發(fā)基金資助計劃(2013SW22)
【分類號】:R392
【正文快照】: 脊髓灰質(zhì)炎病毒(poliovirus,PV)是對人類健康危害最大的病毒之一,也是被人類認識最早最詳盡的病毒之一。PV曾在全球廣泛流行,由其引起的脊髓灰質(zhì)炎(俗稱小兒麻痹)是WHO推行計劃免疫進行控制的重點傳染病之一。PV根據(jù)抗原性不同,可分為3個血清型:Ⅰ型、Ⅱ型和Ⅲ型,各型之間無交

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4 張s,

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