本文關(guān)鍵詞：E75、R78和D82是影響大腸埃希氏菌FtsZ自身組裝及其與MreB相互作用的重要氨基酸

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【摘要】：【目的】探索大腸埃希氏菌Escherichia coli FtsZ突變體FtsZ~(E75A)、FtsZ~(R78G)和FtsZ~(D82A)對(duì)FtsZ自身組裝和FtsZ-MreB相互作用的影響。【方法】利用常規(guī)分子克隆和定點(diǎn)突變技術(shù),構(gòu)建FtsZ及其突變體表達(dá)載體,親和純化得到相應(yīng)的目標(biāo)蛋白;通過同源重組構(gòu)建QN6(ftsZ::yfp-cat)、QN7(ftsZ~(E75A)::yfp-cat)、QN8(ftsZ~(R78G)::yfp-cat)和QN9(ftsZ~(D82A)::yfp-cat)菌株;利用活細(xì)胞成像技術(shù)觀察FtsZ及其突變體的胞內(nèi)定位模式;免疫沉淀和細(xì)菌雙雜交實(shí)驗(yàn)檢測(cè)FtsZ/FtsZ*-FtsZ*或FtsZ/FtsZ*-MreB間的相互作用;光掃描檢測(cè)定點(diǎn)突變對(duì)FtsZ組裝特性的影響�！窘Y(jié)果】FtsZ~(E75A)、FtsZ~(R78G)和FtsZ~(D82A)突變體的功能活性降低、各突變體在E.coli內(nèi)不能正確的定位和形成功能性Z環(huán);FtsZ/FtsZ*-FtsZ*單體間的相互作用減弱或消失,FtsZ*-MreB相互作用破壞;FtsZ突變體體外聚合效率降低�！窘Y(jié)論】FtsZ E75、R78和D82是影響FtsZ正確組裝和功能及FtsZ-MreB相互作用的重要氨基酸。
【作者單位】： 河南大學(xué)醫(yī)學(xué)院抗體藥物河南省工程實(shí)驗(yàn)室;西北農(nóng)林科技大學(xué)林學(xué)系;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81372147) 河南省教育廳自然科學(xué)研究項(xiàng)目(2010B320001) 河南大學(xué)省部共建項(xiàng)目(SBGJ090713)~~
【分類號(hào)】：R378
【正文快照】： 細(xì)菌細(xì)胞的分裂和特定形態(tài)的維持受多種蛋)相互作用形成束狀聚合物,最后在菌體中部形成白的調(diào)節(jié),其中微管蛋白類似物Fts Z和肌動(dòng)蛋白Z環(huán)。Z環(huán)的穩(wěn)定需要Fts A、Zip A、Zap A和類似物Mre B起核心作用[1 2],但具體的機(jī)制目前未Zap B等多種蛋白的參與,其最終起骨架作用,通完全清

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