本文關(guān)鍵詞：抗A型流感病毒聚合酶堿性蛋白1多克隆抗體的制備和鑒定

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【摘要】：流感病毒屬于正黏病毒科,為有包膜包裹的單股負(fù)鏈RNA病毒。它的8個基因片段編碼至少16種病毒蛋白,其中3個蛋白組成流感病毒的聚合酶復(fù)合體。流感病毒聚合酶堿性蛋白1(PB1)是該復(fù)合體的組分之一,在病毒的轉(zhuǎn)錄、復(fù)制及重配中發(fā)揮重要的作用。為研究其功能,構(gòu)建His-PB1(aa 550 755)融合蛋白原核表達(dá)質(zhì)粒,IPTG誘導(dǎo)融合蛋白表達(dá),通過鎳柱親和將其純化,然后作為抗原免疫家兔。對抗血清進(jìn)行間接ELISA檢測,表明抗體效價可達(dá)1∶100 000。兔源PB1蛋白抗血清經(jīng)親和純化后,用于免疫印跡檢測流感病毒W(wǎng)SN毒株P(guān)B1蛋白以及外源轉(zhuǎn)染的FLAG-PB1蛋白,結(jié)果表明該P(yáng)B1抗體具有良好的特異性,同時也能特異性識別其他亞型的A型流感病毒的PB1蛋白,為進(jìn)一步研究流感病毒PB1蛋白的功能奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 中國科學(xué)院微生物研究所;
【基金】：國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃(973計劃)(No.2011CB504705) 國家科技重大專項(xiàng)(No.2013ZX10004611)資助~~
【分類號】：R392
【正文快照】： 流感病毒屬于正黏病毒科,為有包膜包裹的單股負(fù)鏈RNA病毒[1]。流感病毒8個基因片段編碼16種蛋白[2-3]。每個基因片段都被核蛋白(NP)以及RNA依賴的RNA聚合酶包裹,形成病毒核糖核蛋白復(fù)合體[4]。其中,RNA依賴的RNA聚合酶復(fù)合體由聚合酶堿性蛋白1(PB1)、聚合酶堿性蛋白2(PB2)、聚

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本文編號：1257585