本文關(guān)鍵詞：人抗P53蛋白單克隆抗體的制備及評(píng)價(jià)

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【摘要】：目的制備獲得人P53蛋白單克隆抗體,并應(yīng)用于免疫組化檢測。方法利用基因重組方法,將p53基因構(gòu)建到原核質(zhì)粒載體上并誘導(dǎo)表達(dá),將收集獲得的P53蛋白免疫小鼠,經(jīng)細(xì)胞融合及亞克隆手段獲得鼠源單克隆抗體,與商品化的抗體DO-1共同染色蠟塊包埋的病理組織樣本,比較二者的染色結(jié)果。結(jié)果在篩選獲得的與DO-1檢測結(jié)果相近的5株抗體內(nèi),取檢測結(jié)果最接近的1株抗體5E10,經(jīng)Protein A/G株純化抗體,與收集獲得的數(shù)例癌癥組織蠟塊進(jìn)行免疫組化驗(yàn)證,發(fā)現(xiàn)結(jié)果均與DO-1的結(jié)果無明顯差異。結(jié)論成功制備并篩選出1株人抗P53單克隆抗體,可用于免疫組化染色。
【作者單位】： 河南中醫(yī)學(xué)院鄭州市抗體組學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;河南省腫瘤病理診斷試劑工程技術(shù)研究中心;
【基金】：河南中醫(yī)學(xué)院省屬科研業(yè)務(wù)費(fèi)專項(xiàng)(2014KYY-WF-ZZCX3-06)
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： P53蛋白是由393個(gè)氨基酸組成的一類磷酸化蛋白,相對(duì)分子質(zhì)量為53 000,故稱為P53蛋白。p53被稱為基因衛(wèi)士,是迄今發(fā)現(xiàn)與人類惡性腫瘤相關(guān)性最高的基因,也是腫瘤細(xì)胞中基因變異頻率最高的靶基因,50%的腫瘤患者中均發(fā)現(xiàn)p53基因有缺失或突變[1]。P53蛋白的表達(dá)水平受p53基因的影響

【相似文獻(xiàn)】

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