發(fā)布時(shí)間：2017-11-30 09:36

  本文關(guān)鍵詞：FoxO1轉(zhuǎn)錄因子在巨噬細(xì)胞中的表達(dá)與炎癥的關(guān)系

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【摘要】：目的通過研究叉頭框蛋白1(forkhead transcription factors of O class 1,FoxO1)轉(zhuǎn)錄因子mRNA水平和蛋白水平在巨噬細(xì)胞的表達(dá)以及檢測(cè)Foxo1干擾和過表達(dá)后巨噬細(xì)胞分泌的炎癥因子含量,從炎癥進(jìn)展的角度探討FoxO1轉(zhuǎn)錄因子與炎癥之間的關(guān)系。方法①利用脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)刺激巨噬細(xì)胞Ana-1制作炎癥模型,ELISA測(cè)炎癥因子IL-6、TNF-α的濃度;②采用Real-Time PCR,Western Blot測(cè)FoxO1轉(zhuǎn)錄因子在mRNA水平以及蛋白水平的含量;③利用脂質(zhì)體2 000將Fox O1 si RNA轉(zhuǎn)染Ana-1細(xì)胞,采用ELISA檢測(cè)對(duì)照組和干擾組分泌的炎癥因子IL-6、TNF-α的含量;④利用脂質(zhì)體2 000將FoxO1過表達(dá)質(zhì)粒轉(zhuǎn)染Ana-1細(xì)胞,采用ELISA檢測(cè)LPS組和過表達(dá)組炎癥因子IL-6、TNF-α的含量。結(jié)果①ELISA實(shí)驗(yàn)顯示,在LPS的濃度為50 ng/mL時(shí)巨噬細(xì)胞分泌的炎癥因子IL-6、TNF-α含量分別為2 190、1 124 ng/mL,干預(yù)時(shí)間為36 h時(shí)分別為2 190、1 995 ng/mL。此條件下炎癥因子含量最高;②Real-Time PCR實(shí)驗(yàn)和Western blot實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,在LPS組FoxO1轉(zhuǎn)錄因子mRNA水平是對(duì)照組的0.36倍,蛋白水平的表達(dá)量是對(duì)照組的0.58倍;③Foxo1 siRNA干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,干擾組巨噬細(xì)胞分泌炎癥因子TNF-α含量從782 ng/mL上升到1 290 ng/mL,IL-6的含量從161 ng/mL上升到251 ng/mL;4.脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染過表達(dá)FoxO1質(zhì)粒實(shí)驗(yàn)顯示,與LPS組相比,過表達(dá)組巨噬細(xì)胞分泌炎癥因子TNF-α的含量從1 785 ng/mL下降到1 329 ng/mL,IL-6含量從486 ng/mL下降到317 ng/mL。結(jié)論LPS刺激巨噬細(xì)胞Ana-1產(chǎn)生炎癥反應(yīng),導(dǎo)致炎癥因子的釋放,同時(shí)下調(diào)Foxo1轉(zhuǎn)錄因子在mRNA水平和蛋白水平的含量,特異性FoxO1基因沉默可上調(diào)炎癥因子的釋放。過表達(dá)FoxO1可以使炎癥反應(yīng)減輕,證明Foxo1轉(zhuǎn)錄因子參與巨噬細(xì)胞引起的炎癥反應(yīng)。
【作者單位】： 山西醫(yī)科大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【分類號(hào)】：R392
【正文快照】： 炎癥是臨床上常見的病理生理反應(yīng)過程,任何能夠引起組織損傷的因素都可能誘發(fā)炎癥反應(yīng),而且持續(xù)的炎癥會(huì)導(dǎo)致器官和組織的功能障礙,因此如何控制炎癥是目前醫(yī)學(xué)界的一個(gè)難題。在炎癥過程中巨噬細(xì)胞扮演著比較重要角色。雖然巨噬細(xì)胞在損傷和組織修復(fù)中起著重要的保護(hù)作用,但是

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