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兔脂肪干細(xì)胞與軟骨細(xì)胞微球共培養(yǎng)成軟骨分化最適誘導(dǎo)比例的實驗研究

發(fā)布時間:2017-11-25 23:18

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【摘要】:通過間接共培養(yǎng)ADSC與軟骨細(xì)胞微球,得出使ADSC發(fā)生軟骨向分化的最佳比例。體外分離培養(yǎng)新西蘭大白兔ADSC和軟骨細(xì)胞,制成微球分置于Tranwell上下室,實驗分為陽性對照組,陰性對照組,生長因子對照組及不同比例(0.5∶1;1∶1;1∶2;1∶3;1∶5;1∶7)的ADSC和軟骨細(xì)胞共培養(yǎng)組,培養(yǎng)28天后分別行組織形態(tài)學(xué)觀察,GAG、COL-Ⅱ和COL-Ⅹ的定性定量檢測。阿利新藍(lán)-核固紅染色及Ⅱ型膠原免疫組化染色顯示比例為0.5∶1和1∶1的陽性較弱,而Ⅹ型膠原在生長因子對照組的表達(dá)最為強(qiáng)烈。DMMB法顯示總GAG含量在共培養(yǎng)組較陰性對照組均有所增加(P0.05),且增加量與軟骨細(xì)胞的比例呈正相關(guān),但是在ADSC:AC比例達(dá)到1∶5之后有所下降。OHP檢測總膠原蛋白的變化同上,且1∶5組中沉積的膠原量比陰性對照組高出7.3倍。能夠使ADSCs最大程度的表達(dá)軟骨特異性細(xì)胞外基質(zhì),同時使COL-Ⅹ等軟骨肥大標(biāo)志無明顯上調(diào)的ADSC與軟骨細(xì)胞的比例為1∶5,共培養(yǎng)誘導(dǎo)較生長因子能夠抑制ADSC軟骨向分化后的肥大問題。
【作者單位】: 吉林大學(xué)口腔醫(yī)學(xué)院;廣州醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院廣州口腔病研究所口腔醫(yī)學(xué)重點實驗室;
【基金】:吉林省科技發(fā)展計劃項目(20140204022SF) 廣東省教育廳省級高等教育“創(chuàng)新強(qiáng)校工程”專項資金(B16036087) 長春市重大科技攻關(guān)項目(13KG45)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 2(廣州醫(yī)科大學(xué)附屬口腔醫(yī)院,廣州口腔病研究所,口腔醫(yī)學(xué)重點實驗室,廣州510140)引言軟骨一旦損傷便無法自行修復(fù),但組織工程的興起為解決這一難題提供了新的方法。脂肪干細(xì)胞(adipose-derived stem cell,ADSC)因來源豐富、取材方便等優(yōu)點而成為軟骨組織工程理想的種子細(xì)胞[1]

【相似文獻(xiàn)】

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9 張e,

本文編號:1227742


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