本文關(guān)鍵詞：家蠅細(xì)胞色素P450還原酶的原核表達(dá)與活性鑒定

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【摘要】：目的家蠅是重要的衛(wèi)生害蟲,其抗藥性問題突出,其中細(xì)胞色素P450介導(dǎo)的代謝解毒作用增強(qiáng)是其抗藥性的重要機(jī)制。細(xì)胞色素P450還原酶(cytochrome P450 reductase,CPR)是細(xì)胞色素P450酶系的重要組分,建立家蠅細(xì)胞色素P450還原酶(Md CPR)表達(dá)體系有助于通過重組家蠅細(xì)胞色素P450酶系以鑒定家蠅抗藥性的生物化學(xué)機(jī)制。方法將家蠅CPR基因的編碼區(qū)克隆到表達(dá)載體(p B508)上構(gòu)建重組質(zhì)粒,在大腸埃希菌中重組質(zhì)粒經(jīng)異丙基-β-d-硫代半乳糖苷(IPTG)誘導(dǎo)表達(dá),對(duì)表達(dá)的Md CPR蛋白進(jìn)行細(xì)胞定位分析和活性測(cè)定。結(jié)果 Md CPR蛋白在大腸埃希菌中成功地得到表達(dá),分子質(zhì)量為76×103左右,表現(xiàn)出細(xì)胞色素C還原酶活性,主要定位在細(xì)胞的膜成分中。結(jié)論在大腸埃希菌中表達(dá)了具有還原酶活性的Md CPR蛋白,為進(jìn)一步研究家蠅細(xì)胞色素P450的功能及其在抗藥性中的作用奠定了基礎(chǔ)。
【作者單位】： 內(nèi)蒙古大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;中國科學(xué)院動(dòng)物研究所農(nóng)業(yè)蟲害鼠害綜合治理研究國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國科學(xué)院大學(xué);
【基金】：北京市自然科學(xué)基金(5142014)~~
【分類號(hào)】：R384.2
【正文快照】： 家蠅(Musca domestica)作為一種常見的疾病媒素。P450s是一類含有血紅蛋白的氧化酶類,在生介,不僅危害人類健康,同時(shí)危害畜牧業(yè)的發(fā)展[1]。物體內(nèi)可催化許多初級(jí)和次級(jí)代謝反應(yīng),如蛻皮激隨著化學(xué)農(nóng)藥的廣泛使用,家蠅普遍產(chǎn)生了抗藥性[2],素的合成和殺蟲劑及植物次級(jí)代謝產(chǎn)物等

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