本文關鍵詞：人LOX-1基因畢赤酵母表達載體的構建與表達研究

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【摘要】：目的構建血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體-1(LOX-1)真核表達載體,篩選高表達菌株,為體外獲得有活性重組蛋白奠定基礎。方法以實驗室保存的含有人源LOX-1基因的質粒為模板PCR擴增LOX-1基因,經(jīng)過TA克隆后亞克隆至酵母表達載體p PICZαA,將獲得的重組質粒電轉化至畢赤酵母X-33,利用原位雙膜法快速檢測陽性高表達菌株,最后經(jīng)過甲醇誘導,采用Western blot檢測LOX-1的表達。結果成功構建LOX-1真核表達載體,雙膜法篩選到高表達菌株;Western blot結果顯示,LOX-1在上清中得到表達。結論 LOX-1基因在畢赤酵母細胞上清中得到表達,為體外獲得活性重組蛋白和研究其致動脈粥樣硬化功能奠定基礎。
【作者單位】： 大連大學生命科學與技術學院糖脂代謝重點實驗室;
【基金】：國家自然科學基金資助項目(81202536) 遼寧省大學生創(chuàng)新訓練項目(201511258040)
【分類號】：R3416
【正文快照】： 血凝素樣氧化低密度脂蛋白受體-1(lectin-likeoxidized low-density lipoprotein receptor-1,LOX-1)屬于E類清道夫家族成員,是C型植物凝集素樣Ⅱ型跨膜蛋白,由273個氨基酸組成[1]。在結構上由1個短的N端細胞質區(qū),單鏈跨膜區(qū),細胞外區(qū)域和1個C端血凝素樣配基連接區(qū)4個部分組成[，

本文編號：1214943