應(yīng)用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)研究脾虛大鼠血清代謝物譜群特征
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【摘要】:目的應(yīng)用液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)(LC-MS)研究脾氣虛、脾陽虛大鼠血清代謝物譜群變化特征,并從小分子代謝物水平探討脾虛證候本質(zhì)。方法 21只SPF級(jí)雄性SD大鼠,隨機(jī)分為正常組、脾氣虛組、脾陽虛組,每組7只。脾氣虛證模型造模方法采用先飽食1天,再禁食2天,自由飲水,每日游泳至力竭,水溫35~37℃,連續(xù)15天。脾陽虛證造模方法采用脾氣虛證加灌服20%番瀉葉水浸劑(2 m L/100 g),早晚各1次,連續(xù)1周。在造模結(jié)束后,根據(jù)大鼠的一般情況、體重變化及肛溫的改變進(jìn)行模型評(píng)價(jià),運(yùn)用LC-MS技術(shù)對(duì)大鼠進(jìn)行血清代謝組學(xué)檢測,應(yīng)用正交偏最小二乘判別分析研究組間代謝物譜圖差異,并通過變量重要性投影(OPLS-DA)選取血清中與證型相關(guān)的生物標(biāo)志物。結(jié)果與造模前比較,脾氣虛組和脾陽虛組大鼠的體重均有顯著降低,兩組體重差值與正常組比較,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.01),脾陽虛組較脾氣虛組體重值降低更明顯(P0.05);與正常組比較,脾氣虛組和脾陽虛組大鼠的肛溫下降,脾陽虛組較脾氣虛組降低更多(P0.05,P0.01)。與正常組比較,脾氣虛組與脾陽虛組PC(19∶0)/PE(22∶0)、PC(17∶0)/PE(20∶0)、癸酸、油酸、硬脂酸、琥珀酸、延胡索酸、蘋果酸、葡萄糖含量升高,花生四烯酸、亞麻酸、十二碳烯酸、雄酮、4-庚酮、DHAP(6∶0)、尿苷等含量降低。與脾氣虛組比較,脾陽虛組PC(22∶1)、PC(22∶6)、PE(18∶0)/PC(15∶0)、視黃醇及脫氧胞苷相對(duì)含量顯著升高,PC(18∶1)、PC(19∶3)、PC(20∶3)、PC(17∶0)/PE(20∶0)、PC(19∶1)/PE(22∶1)、PC(19∶0)/PE(22∶0)、PC(17∶1)/PE(20∶1)、PC(16∶1)/PE(19∶1)、膽酸、馬尿酸、糠酸、十一烷二甲酸、棕櫚油酸、羥基硬脂酸、二十碳三烯酸、苯丙氨酸、酪氨酸、谷氨酸、絲氨酸、氨基甲酰基天冬氨酸、棕櫚酰肉堿、肉豆蔻酰肉堿、乙酰左旋肉堿及亞油肉堿相對(duì)含量較脾氣虛組顯著降低。結(jié)論脾氣虛及脾陽虛模型大鼠血清中多種代謝物的相對(duì)含量發(fā)生了顯著變化,并初步獲得了一些可能與脾虛證候相關(guān)的潛在小分子生物標(biāo)志物。這可能為探索脾虛的中醫(yī)證候的科學(xué)內(nèi)涵、病理機(jī)制提供了一定的數(shù)據(jù)參考。
【作者單位】: 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)中醫(yī)臟象理論及應(yīng)用教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】:國家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃(“973”計(jì)劃)資助項(xiàng)目(No.2013CB531704) 國家自然科學(xué)基金青年基金項(xiàng)目(No.81202834)
【分類號(hào)】:R228;R-332
【正文快照】: 脾乃中醫(yī)五臟之一,擔(dān)負(fù)著人體運(yùn)化、升清、統(tǒng)血的重要生理功能,其中“脾主運(yùn)化”是脾最主要的生理功能,若脾運(yùn)化功能失常,則會(huì)出現(xiàn)食少、腹脹、大便溏薄等脾虛失運(yùn)證候。李東垣的《脾胃論·脾胃盛衰論》中就有“百病皆脾胃衰而生也”之說,F(xiàn)代研究表明,脾虛證與消化系統(tǒng)、分
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