本文關(guān)鍵詞：內(nèi)皮抑素30肽對HepG2細(xì)胞黏附、侵襲能力影響的機(jī)制研究

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【摘要】：目的探討RGD修飾的人內(nèi)皮抑素30肽對HepG2細(xì)胞黏附、侵襲的影響及作用機(jī)制。方法人工合成人內(nèi)皮抑素1~30位氨基酸(30肽,序列25~31由RGIRGAD改為RGDRGD)所對應(yīng)的核苷酸序列,連接到質(zhì)粒pTYB2中,再轉(zhuǎn)化至大腸埃希菌BL21(DE3)中表達(dá),同法合成人內(nèi)皮抑素1~27位氨基酸構(gòu)成的27肽作為對照。細(xì)胞黏附實驗及Transwell實驗分別檢測30肽和27肽對HepG2細(xì)胞黏附能力和侵襲能力的影響,同時篩選與侵襲作用相關(guān)的整合素;免疫熒光檢測30肽和27肽對αvβ3整合素的聚集作用,流式細(xì)胞儀檢測30肽和27肽對HepG2細(xì)胞表面相應(yīng)整合素表達(dá)的影響;逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)及Western blot檢測30肽和27肽對HepG2細(xì)胞TIMP1和TIMP2 mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)量的影響。結(jié)果 30肽能明顯抑制HepG2細(xì)胞黏附、侵襲,對侵襲作用的影響與整合素αvβ3相關(guān),同時,30肽能上調(diào)Hep G2細(xì)胞中TIMP1和TIMP2 mRNA及蛋白質(zhì)的表達(dá),30肽加αvβ3抗體后,上述作用明顯增強(qiáng)。結(jié)論 30肽可能是通過整合素αvβ3發(fā)揮其抗腫瘤侵襲轉(zhuǎn)移作用,可以成為臨床上肝癌的輔助化療藥物發(fā)揮作用。
【作者單位】： 齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院生物化學(xué)教研室;
【基金】：黑龍江省教育廳資助項目(No:12511619) 齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院博士專項科研基金項目
【分類號】：R329.2
【正文快照】： 內(nèi)皮抑素是O'Reilly等[1]發(fā)現(xiàn)的一種內(nèi)源性血管生成抑制劑,由膠原蛋白ΧⅧ羧基端的184個氨基酸殘基組成,研究發(fā)現(xiàn)其具有抑制腫瘤生長、改善肺纖維化等作用,且與其他多種疾病相關(guān)[2-3],因此,內(nèi)皮抑素日益受到研究者的關(guān)注和重視。已有研究證實,內(nèi)皮抑素活性區(qū)主要在N端的1~27個

【共引文獻(xiàn)】

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【相似文獻(xiàn)】

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本文編號：1187777