本文關(guān)鍵詞：檢測(cè)犬弓形蟲SAG3抗體間接ELISA方法的建立

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【摘要】：目的以弓形蟲重組SAG3蛋白為抗原,建立一種檢測(cè)犬弓形蟲抗體的間接ELISA方法。方法采用棋盤滴定法確定抗原的包被濃度和陽(yáng)性血清稀釋度,再對(duì)該方法的封閉劑以及封閉時(shí)間、犬弓形蟲陽(yáng)性血清孵育時(shí)間、二抗稀釋度以及加入顯色液孵育時(shí)間等各項(xiàng)條件進(jìn)行優(yōu)化;通過(guò)對(duì)弓形蟲感染犬血清及犬心絲蟲、等孢球蟲、蛔蟲及巴貝斯蟲感染血清的檢測(cè)評(píng)價(jià)方法的敏感性和特異性。結(jié)果該方法最佳優(yōu)化條件分別為:抗原包被濃度0.82μg/孔,封閉劑為含10%胎牛血清的PBST,被檢血清稀釋度1∶20;兔抗犬酶標(biāo)二抗稀釋度1∶8 000。優(yōu)化的ELISA敏感性為1∶1 280,犬心絲蟲、等孢球蟲、蛔蟲及巴貝斯蟲感染血清均未發(fā)生交叉陽(yáng)性反應(yīng);批間、批內(nèi)重復(fù)性試驗(yàn)的變異系數(shù)均15%。結(jié)論建立的ELISA方法特異性較強(qiáng),敏感性高,批內(nèi)、批間重復(fù)性較好,可用于犬弓形蟲感染的檢測(cè)。
【作者單位】： 天津農(nóng)學(xué)院動(dòng)物科學(xué)與動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院;吉林大學(xué)動(dòng)物醫(yī)學(xué)學(xué)院;
【基金】：國(guó)家公益性行業(yè)(農(nóng)業(yè))科研專項(xiàng)(No.201303042) 吉林省科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(No.20130206023NY)
【分類號(hào)】：S858.292;R382.5
【正文快照】： ***弓形蟲寄生于人和許多種動(dòng)物的有核細(xì)胞,引起人畜共患弓形蟲病(toxoplasmosis)。孕婦或孕畜感染弓形蟲可引起早產(chǎn)、流產(chǎn)甚至死胎,免疫功能受損、缺陷患者感染及垂直感染�？蓪�(dǎo)致嚴(yán)重的并發(fā)癥甚至死亡,健康人感染后成為無(wú)癥狀的帶蟲宿主。部分感染者有淋巴結(jié)腫大的癥狀[1-2]

【相似文獻(xiàn)】

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