甲型H7N9流感病毒多重PCR-酶聯(lián)免疫吸附檢測方法的建立及應(yīng)用
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【摘要】:目的建立一種快捷靈敏的禽流感病毒PCR-ELISA檢測技術(shù)。方法針對禽流感病毒M基因(M)、H7基因(H7)、N9基因(N9)3個基因片段的保守序列,通過生物素與地高辛的特異性標記,最后通過酶聯(lián)免疫吸附反應(yīng)判斷PCR擴增的有無。結(jié)果M、H7、N9 3個基因片段所能檢測的最低拷貝數(shù)分別為1.43×103copy/μl、1.04×102copy/μl、8.80×103copy/μl,其敏感度比普通PCR擴增提高了10倍~100倍,且不同流感病毒亞型之間、不同種屬病毒之間均不存在交叉反應(yīng)現(xiàn)象。另外還檢測了114份臨床標本,結(jié)果與雞胚培養(yǎng)匹配率達100.0%。結(jié)論本文通過特異性和敏感性實驗顯示此方法靈敏度高、特異性強,且操作簡單,可以廣泛地應(yīng)用于流感病毒的實驗室檢測。
【作者單位】: 南京大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院;江蘇省疾病預(yù)防控制中心;
【基金】:江蘇省醫(yī)學(xué)重點人才基金(RC2011084) 江蘇省自然科學(xué)基金(BK20131450)
【分類號】:R373.13;S852.65
【正文快照】: 禽流感是由禽流感病毒引起的一種禽類的感染和疾病綜合征。禽流感病毒是由Perroncito于1987年在意大利首次報道的,此后又在世界上多個國家和地區(qū)被陸續(xù)發(fā)現(xiàn)。根據(jù)禽流感病毒對禽類致病性的不同,可將其分為低致病性禽流感病毒(LPAI)和高致病性禽流感病毒(HPAI)[1]。H7N9屬禽流
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,本文編號:1184951
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