無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)Vero細胞制備狂犬病病毒工藝的建立
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【摘要】:目的建立無血清培養(yǎng)基(virus production-serum-free medium,VP-SFM)培養(yǎng)Vero細胞制備狂犬病病毒CTN-1V株的工藝。方法分別采用VP-SFM和含5%牛血清DMEM于方瓶中培養(yǎng)Vero細胞制備狂犬病病毒CTN-1V株,比較無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)不同代次Vero細胞間及無血清與含血清培養(yǎng)基培養(yǎng)Vero細胞間制備的狂犬病病毒滴度及效力。將2 g/L微載體cytodex-1加至250 ml spinner flask中,加入Vero細胞,37℃培養(yǎng)3 d,按MOI=0.02接種狂犬病病毒CTN-1V株,檢測病毒收獲液的病毒滴度及效力,每天顯微鏡下觀察細胞生長情況,計算細胞比生長速率。結(jié)果無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)不同代次Vero細胞制備狂犬病病毒的滴度和效力差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);無血清和含血清培養(yǎng)基培養(yǎng)Vero細胞制備狂犬病病毒的滴度差異無統(tǒng)計學意義(P0.05),但無血清培養(yǎng)基培養(yǎng)Vero細胞制備狂犬病病毒效力明顯高于含血清的培養(yǎng)基(P0.05)。攪拌瓶微載體系統(tǒng)培養(yǎng)Vero細胞制備狂犬病病毒,細胞貼壁均勻,生長良好,收獲病毒液的平均病毒滴度為6.50 lg FFU/ml,平均病毒效力為6.77 IU/ml。結(jié)論初步建立了微載體系統(tǒng)無血清培養(yǎng)Vero細胞制備狂犬病病毒的工藝,為無血清規(guī);苽淇袢∫呙绲於嘶A(chǔ)。
【作者單位】: 蘭州生物制品研究所有限責任公司;
【基金】:甘肅省戰(zhàn)略性新興產(chǎn)業(yè)創(chuàng)新支撐專項課題[甘財建(2014)111號]
【分類號】:R392
【正文快照】: Vero細胞為全球認可的生產(chǎn)人用及動物用疫苗的細胞基質(zhì),基于其對多種病毒敏感的特性,建立Vero細胞的規(guī);囵B(yǎng)技術(shù)在病毒性疫苗、重組蛋白、單克隆抗體等生產(chǎn)技術(shù)平臺中具有重要的價值。傳統(tǒng)的動物細胞培養(yǎng)常添加牛血清、胰酶等組分,其在促進細胞生長、消化傳代等方面的作用
【相似文獻】
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