本文關(guān)鍵詞：重組大腸桿菌SAHN和LuxS蛋白表達及群感效應(yīng)分析

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【摘要】：為研究大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)S-腺苷高半胱氨酸核苷酶(S-adenosylhomocysteine nucleosidase,SAHN)與S-核糖基高半胱氨酸酶(S-ribosylhomocysteinase,Lux S)的活性對菌體群感效應(yīng)的影響,利用聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(polymerase chain reaction,PCR)擴增sahn與lux S目的基因,構(gòu)建p ET-28a-SAHN與p ET-28a-Lux S重組表達載體,轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21,以IPTG誘導(dǎo)表達;以哈氏弧菌BB170為報告菌株,通過測定誘導(dǎo)前后的熒光強度檢測信號分子AI-2相對量;通過96孔板生物膜實驗,對構(gòu)建菌株在誘導(dǎo)前后的生物膜生成量進行測定。結(jié)果表明:SAHN與Lux S酶蛋白在誘導(dǎo)后的大腸桿菌AI-2的表達量分別為誘導(dǎo)前的3.93、3.89倍,生物膜致密度分別為誘導(dǎo)前的1.8、1.6倍;大腸桿菌經(jīng)誘導(dǎo)后,表達過量的SAHN酶蛋白對菌體的生長分裂及群感效應(yīng)的影響更大。
【作者單位】： 濟南大學(xué)生物科學(xué)與技術(shù)學(xué)院;華僑大學(xué)生物醫(yī)學(xué)學(xué)院;
【分類號】：Q812;;Q932
【正文快照】： 在感染病領(lǐng)域,耐藥細(xì)菌的感染是全球關(guān)注的重要問題之一。目前采用的相應(yīng)策略主要有:合理使用抗生素以降低致細(xì)菌耐藥變異速度;探討新的抑菌途徑,研發(fā)新型抗菌藥物對抗耐藥菌。通過甲基化修飾改變抗菌藥物靶點的結(jié)構(gòu)是以大腸桿菌(E.coli)為代表的致病菌的一種重要的耐藥機制[1

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