sirt2基因高表達(dá)對人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞衰老的抑制作用
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【摘要】:目的:觀察sirt2基因高表達(dá)對人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(h UC-MSCs)衰老的影響。方法:擴(kuò)增人sirt2 ORF序列,利用腺病毒載體構(gòu)建sirt2基因高表達(dá)的重組腺病毒(p Ad-sirt2),空斑法測定病毒滴度;感染h UC-MSCs,倒置熒光顯微鏡下觀察熒光表達(dá)情況;實(shí)驗(yàn)分為P3組(第3代h UC-MSCs)、P15組(第15代h UC-MSCs)和感染組(用p Ad-sirt2腺病毒感染第15代h UC-MSCs),CCK-8檢測細(xì)胞增殖情況,流式細(xì)胞術(shù)分析細(xì)胞周期變化,β-半乳糖苷酶染色后檢測陽性細(xì)胞率。結(jié)果:成功制備p Ad-sirt2重組腺病毒,病毒滴度為1.8×1011pfu/L;熒光觀察證實(shí)Sirt2蛋白在h UC-MSCs中有效表達(dá);與P15組相比,sirt2高表達(dá)可促進(jìn)h UC-MSCs增殖,并將細(xì)胞周期阻滯在S期,β-半乳糖苷酶陽性細(xì)胞率降低(P均0.05)。結(jié)論:sirt2基因高表達(dá)可促進(jìn)h UC-MSCs增殖,延長細(xì)胞周期,并有效抑制h UC-MSCs的衰老。
【作者單位】: 鄭州大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院干細(xì)胞研究室;鄭州大學(xué)附屬鄭州中心醫(yī)院轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)中心;鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院干細(xì)胞研究室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目U1404313,81471306 河南省高?萍紕(chuàng)新團(tuán)隊(duì)基金資助項(xiàng)目15IRTSTHN022 河南省科技創(chuàng)新人才計(jì)劃基金資助項(xiàng)目154200510008
【分類號】:R329
【正文快照】: 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(human umbilical cordmesenchymal stem cells,h UC-MSCs)具有自我更新和多向分化潛能,為脊髓損傷、腦損傷等神經(jīng)系統(tǒng)疾病的治療帶來希望[1-2]。但是體外培養(yǎng)的h UC-MSCs同正常細(xì)胞一樣,也會呈現(xiàn)衰老變化,從而限制干細(xì)胞的使用[3]。研究發(fā)現(xiàn)sirt2參與調(diào)控
【相似文獻(xiàn)】
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