本文關(guān)鍵詞：硫化氫通過(guò)CaMKKβ-AMPK信號(hào)通路延緩大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞老化

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【摘要】：該研究探討了硫化氫(H2S)延緩大鼠主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞(rat aortic endothelial cells,RAECs)老化的機(jī)制。原代RAECs傳代培養(yǎng)至第4代為年輕組,傳代至第12代為老年組。從第4代起,給予H2S的供體Na HS培養(yǎng)至第12代為Na HS組;從第4代起培養(yǎng)至第12代,在提取處理細(xì)胞前6 h加入Ca MKKβ(Ca2+/calmodulin-dependent protein kinase kinaseβ)特異性抑制劑STO-609共培養(yǎng),即STO-609組;從第4代起,給予H2S的供體Na HS培養(yǎng)至第12代,在提取處理細(xì)胞前6 h加入STO-609共培養(yǎng),即Na HS+STO-609組。采用SA-β-gal(senescence-associatedβ-galactosidase)染色法和DAPI熒光染色法檢測(cè)細(xì)胞的老化程度和老化相關(guān)異染色質(zhì)(senescence-associated heterochromatin foci,SAHF)的表達(dá)變化。通過(guò)化學(xué)比色法檢測(cè)RAECs的NO(nitric oxide)含量。應(yīng)用Western blot方法檢測(cè)細(xì)胞Ca MKKβ、AMPK(AMP-activated protein kinase)和p-AMPK蛋白的表達(dá)。結(jié)果顯示,與年輕組相比,老年組細(xì)胞老化程度明顯增加,細(xì)胞中SA-β-gal陽(yáng)性率和SAHF形成率顯著增加(P0.01),NO含量明顯下降(P0.01)。與老年組相比,Na HS處理組的SA-β-gal陽(yáng)性率和SAHF形成率明顯下降,同時(shí)NO含量上升(P0.01)。與年輕組相比,老年組Ca MKKβ、AMPK和p-AMPK蛋白質(zhì)水平明顯降低(P0.01),而給予Na HS處理后,Ca MKKβ、AMPK和p-AMPK增加(P0.05)。給予STO-609阻斷Ca MKKβ信號(hào)通路,能夠降低或消除Na HS的細(xì)胞保護(hù)作用(P0.01)。結(jié)果表明,外源性H2S通過(guò)影響Ca MKKβ-AMPK信號(hào)通路減輕RAECs的衰老過(guò)程,延緩了細(xì)胞老化的進(jìn)程。
【作者單位】： 徐州醫(yī)科大學(xué)生理學(xué)系;徐州醫(yī)科大學(xué)病理學(xué)系;
【基金】：江蘇省自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號(hào):BK20131119) 國(guó)家自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號(hào):81200250) 江蘇省研究生創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目(批準(zhǔn)號(hào):KYLX14-1444)資助的課題~~
【分類號(hào)】：R363
【正文快照】： 江蘇省自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號(hào):BK20131119)、國(guó)家自然科學(xué)基金(批準(zhǔn)號(hào):81200250)和江蘇省研究生創(chuàng)新計(jì)劃項(xiàng)目(批準(zhǔn)號(hào):KYLX14-1444)資助的課題網(wǎng)絡(luò)出版時(shí)間:2016-05-26 16:14:31 URL:http://www.cnki.net/kcms/detail/31.2035.Q.20160526.1614.006.html衰老引起的血管結(jié)構(gòu)和功能

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中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

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本文編號(hào)：1164702