本文關(guān)鍵詞：TRPV1通道異源表達體系的建立和功能的初步研究

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【摘要】：目的構(gòu)建能夠表達TRPV1通道用于實驗研究的HEK 293T細胞表達體系。方法采用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染方式將TRPV1質(zhì)粒轉(zhuǎn)入人胚胎腎HEK 293T細胞,建立TRPV1型通道瞬時異源表達體系,并對轉(zhuǎn)染后的TRPV1表達體系進行了鑒定,同時對該通道功能特性進行了研究。結(jié)果經(jīng)熒光顯微鏡觀察,轉(zhuǎn)染率可達40%~50%;Western Blot研究發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染后的HEK 293T細胞在與TRPV1通道蛋白相應(yīng)的位置上具有明顯的條帶,提示TRPV1通道蛋白在轉(zhuǎn)染后的細胞中有異源性表達;共聚焦顯微成像顯示,轉(zhuǎn)染后的HEK293T細胞在受到TRPV1通道激動劑刺激后,胞內(nèi)熒光強度明顯變強,提示TRPV1通道介導(dǎo)鈣離子功能正常。結(jié)論研究結(jié)果表明,基于HEK 293T細胞的TRPV1通道瞬時轉(zhuǎn)染的異源表達體系成功構(gòu)建。
【作者單位】： 哈爾濱商業(yè)大學生命科學與環(huán)境科學研究中心;中國中醫(yī)科學院中藥研究所;
【基金】：國家自然科學基金面上項目(No 81274112,81373986,81473372);國家自然科學基金青年項目(No 81403125,81403322) 北京市自然科學基金(No 7152106)
【分類號】：R329.2
【正文快照】： TRPV1通道又被稱為辣椒素受體,是瞬變感受器電位離子通道蛋白(transient receptor potential ion channel pro-tein,TRP)家族中的第一個被發(fā)現(xiàn)和克隆的成員,由432個氨基酸組成,也是目前研究得最多的TRP家族成員之一[1-2]。TRPV1通道組織分布廣泛,表達于背根神經(jīng)節(jié)和三叉神經(jīng)節(jié)

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本文編號：1156853