本文關(guān)鍵詞：一種快速核酸提取試劑在流感病毒檢測(cè)中的應(yīng)用評(píng)價(jià)

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【摘要】：目的探討一種快速核酸提取試劑在流感病毒檢測(cè)中的適用性及有效性。方法選取流感病毒H3亞型、乙型Yamagata系細(xì)胞株和甲型H1N1型雞胚株各1株,對(duì)其倍比稀釋液及2015年北京市流感病原學(xué)監(jiān)測(cè)陽性的67份咽拭子樣本,同時(shí)采用快速提取法及離心柱提取法提取病毒核酸,經(jīng)實(shí)時(shí)熒光PCR法進(jìn)行定性、定量檢測(cè),檢測(cè)結(jié)果采用SPSS19.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果快速提取法提取細(xì)胞培養(yǎng)液、雞胚培養(yǎng)液中流感病毒核酸的最低檢測(cè)限高于離心柱法10倍,咽拭子樣本則高100倍;快速提取法提取核酸后檢測(cè)到的病毒載量均低于離心柱法,其中對(duì)含有病毒量較高的毒株檢測(cè)到的病毒載量低于離心柱法10倍,而對(duì)病毒量較少的咽拭子樣本,則低100倍;快速提取法穩(wěn)定性優(yōu)于離心柱法;提取后的核酸-80℃保存10 d后凍融復(fù)測(cè),快速提取法核酸損失量大于離心柱法。67份離心柱提取法檢測(cè)陽性咽拭子樣本使用快速提取法提取核酸后檢測(cè),兩種方法陽性符合率總計(jì)為92.54%,其中10~102拷貝/ml組,陽性符合率為76.92%,102~103拷貝/ml組,陽性符合率為92.59%,103拷貝/ml組,陽性符合率為100%。結(jié)論快速提取法具有穩(wěn)定性高、易于操作、不易污染的優(yōu)勢(shì),適用于細(xì)胞培養(yǎng)液、雞胚培養(yǎng)液等病毒含量較高的大量樣本中流感病毒核酸提取,適于檢測(cè)樣本量大、人手不足、設(shè)備欠缺的基層實(shí)驗(yàn)室使用;但-80℃凍融后核酸損失量較大,不宜反復(fù)凍融后使用;傳統(tǒng)的離心柱法對(duì)于病毒含量較少的咽拭子樣本及核酸需被反復(fù)凍融使用時(shí)具有優(yōu)勢(shì)。
【作者單位】： 北京市疾病預(yù)防控制中心 北京市預(yù)防醫(yī)學(xué)研究中心;中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所;
【基金】：北京市衛(wèi)生系統(tǒng)高層次衛(wèi)生技術(shù)人才培養(yǎng)計(jì)劃項(xiàng)目(No.2013-3-098) 北京市優(yōu)秀人才培養(yǎng)資助青年拔尖個(gè)人項(xiàng)目(No.2014000021223ZK36) 北京市科技計(jì)劃課題(No.D141100003114001)~~
【分類號(hào)】：R373.13
【正文快照】： 作者單位:1.北京市疾病預(yù)防控制中心,北京市預(yù)防醫(yī)學(xué)研究中心,北京100013;2.中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所,北京102206Corresponding author:YANG Peng,Email:yangpengcdc@163.com流行性感冒(流感)病毒是一種負(fù)鏈RNA病毒,具有易變性,其導(dǎo)致的流感傳播快,發(fā)病急,易引起

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1 劉文;柯輝鵬;梁紅;;動(dòng)植物總核酸提取試驗(yàn)[J];仲愷農(nóng)業(yè)技術(shù)學(xué)院學(xué)報(bào);2008年03期

2 張麗;楊蓮茹;吳紹強(qiáng);;核酸提取方法的研究進(jìn)展[J];中國動(dòng)物檢疫;2011年12期

3 韓峰,宮倩紅,史曉，

本文編號(hào)：1138494