本文關(guān)鍵詞：尾加壓素Ⅱ誘導巨噬細胞分泌巨噬細胞集落刺激因子

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【摘要】：目的探索尾加壓素Ⅱ(UⅡ)能否促進小鼠單核巨噬細胞系RAW264.7細胞分泌巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF),并探討相關(guān)的信號機制。方法培養(yǎng)小鼠單核巨噬細胞系RAW264.7細胞,以Real-time PCR法和ELISA法分別檢測細胞的M-CSF mRNA和蛋白表達水平,用細胞免疫印跡法檢測p38MAPK和ERK的磷酸化水平。結(jié)果 UⅡ呈濃度依賴性和時間依賴性促進RAW264.7細胞中M-CSF mRNA和蛋白水平的表達,最大效應時間均為刺激12 h,M-CSF mRNA水平是對照組水平的2.73倍,蛋白表達水平顯著高于對照組水平[(50.04±4.28)pg/ml比(20.39±2.75)pg/ml,P0.01],是對照組水平的2.45倍;最大效應濃度均為10-8mol/L和10-7mol/L,以10-8mol/L UⅡ刺激12 h,M-CSF的mRNA和蛋白表達水平較對照組分別增加了97.3%和80.8%。采用UⅡ受體(UT)阻斷劑Urantide、ERK阻斷劑PD98059和p38MAPK阻斷劑SB203580分別預處理細胞后,M-CSF蛋白水平較UⅡ組顯著降低,分別為[(45±4.04)pg/ml比(57.47±2.93)pg/ml]、[(42.13±4.28)pg/ml比(57.47±2.93)pg/ml]和[(44±5.34)pg/ml比(57.47±2.93)pg/ml],差異均有統(tǒng)計學意義(均P0.05)。10-8mol/L UⅡ刺激細胞3 min顯著促進ERK和p38MAPK蛋白磷酸化,5 min時ERK磷酸化水平達到峰值,至15 min仍持續(xù)高值,而p38MAPK在15 min時磷酸化達到峰值;30 min時,兩者的磷酸化水平均減弱。結(jié)論UⅡ可通過與受體結(jié)合活化ERK和p38MAPK信號通路促進RAW264.7細胞中M-CSF的表達。
【作者單位】： 北京大學第一醫(yī)院心內(nèi)科;
【關(guān)鍵詞】： 巨噬細胞集落刺激因子 炎癥 尾加壓素Ⅱ
【基金】：高等學校博士學科點專項科研基金(20120001120010)
【分類號】：R392
【正文快照】： 尾加壓素Ⅱ(urotensinⅡ,UⅡ)是一種重要的血管活性肽,自1999年發(fā)現(xiàn)UⅡ在人冠狀動脈粥樣硬化斑塊中強表達以來,UⅡ在動脈粥樣硬化中的作用備受關(guān)注[1]。本研究組前期研究顯示,嚴重冠狀動脈疾病患者血漿UⅡ水平升高,與冠心病的嚴重程度密切相關(guān)[2],載脂蛋白E缺陷鼠(Apo E-/-)第

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本文編號：1124396