本文關(guān)鍵詞：miR-93真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其表達(dá)驗(yàn)證

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【摘要】：目的構(gòu)建人miR-93真核表達(dá)載體,并驗(yàn)證其表達(dá)效果,為進(jìn)一步研究miR-93的生物學(xué)功能提供有利工具。方法用PCR方法從293T細(xì)胞基因組DNA中擴(kuò)增miR-93前體序列,引物引入酶切位點(diǎn)和保護(hù)堿基,產(chǎn)物用限制性內(nèi)切酶EcoRⅠ和BglⅡ雙酶切后插入pEZX-MR04表達(dá)載體中,構(gòu)建miR-93真核表達(dá)載體pEZX-MR04-miR-93。構(gòu)建好的載體用雙酶切、PCR和測(cè)序鑒定,同時(shí)轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞,用Real time PCR檢測(cè)重組pEZX-MR04-miR-93質(zhì)粒的miR-93表達(dá)效率。結(jié)果成功構(gòu)建miR-93真核表達(dá)載體pEZX-MR04-miR-93,重組pEZX-MR04-miR-93質(zhì)粒轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞后miR-93表達(dá)上升約21倍。結(jié)論構(gòu)建的miR-93真核表達(dá)載體pEZX-MR04-miR-93可顯著上調(diào)細(xì)胞中miR-93水平,為進(jìn)一步研究miR-93在泌尿系腫瘤中的生物學(xué)功能提供可靠工具,奠定了堅(jiān)實(shí)的實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【作者單位】： 西安交通大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科;
【關(guān)鍵詞】： miR- 表達(dá)載體 pEZX-MR T
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(No.81572516) 陜西省國(guó)際科技合作與交流計(jì)劃項(xiàng)目(No.2016KW-021)
【分類號(hào)】：R3416
【正文快照】： 微小RNA(microRNA,miR)是一類廣泛存在于生物體內(nèi)的長(zhǎng)度約為19~25個(gè)堿基的單鏈非編碼RNA,自被發(fā)現(xiàn)以來(lái),數(shù)以千計(jì)的microRNA相繼被報(bào)道并研究。越來(lái)越多的研究證實(shí),microRNA可廣泛參與生物體的各項(xiàng)生物學(xué)行為,包括腫瘤的進(jìn)展、生物體的發(fā)育、心腦血管疾病、骨關(guān)節(jié)炎等。人miR-9

【相似文獻(xiàn)】

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1 牛嗣云;岳鳳鳴;陳志宏;高維娟;高福祿;;人胰島素樣生長(zhǎng)因子-1基因克隆及其真核表達(dá)載體的構(gòu)建[J];解剖學(xué)雜志;2008年05期

2 彭武建,戴勇,李體遠(yuǎn),杜珙,孫文學(xué),陳德珩,徐卓佳;人組織激肽釋放酶基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定[J];廣東醫(yī)學(xué);2003年12期

3 王福祥,孫永濤,李光玉;人白細(xì)胞介素-18真核表達(dá)載體的構(gòu)建及測(cè)序分析[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2004年02期

4 劉娟,孫永濤,杜德偉,李光玉,劉秋平,翟嵩;人中性粒細(xì)胞多肽1,3真核表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2004年10期

5 徐卓佳,戴勇,李體遠(yuǎn),彭武建;重組人促紅細(xì)胞生成素四環(huán)素調(diào)控真核表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定[J];中國(guó)醫(yī)師雜志;2005年09期

6 趙杰;張瑞;許予明;趙國(guó)強(qiáng);郭建新;宋波;韓志強(qiáng);;真核表達(dá)載體pEGFP-C_3-MASH-1的構(gòu)建[J];醫(yī)藥論壇雜志;2006年08期

7 任淑婷;于琳華;徐長(zhǎng)福;高廣道;;四環(huán)素誘導(dǎo)性人肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子真核表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定[J];南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào);2006年10期

8 金善愛;柴紅梅;崔極哲;楊波;吳宏;柳忠輝;張曉光;;人轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β_1基因克隆、測(cè)序及真核表達(dá)載體的構(gòu)建[J];吉林醫(yī)學(xué);2008年23期

9 陳松建;徐錫金;霍霞;張寶;梁曉;陳剛建;;真核表達(dá)載體pIRES-EGFP-PDGF-B的構(gòu)建及在293T細(xì)胞中的表達(dá)[J];實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志;2008年22期

10 陳麗華;張新海;謝鑫;金伯泉;;人pSecTag2B-CD226真核表達(dá)載體的構(gòu)建、表達(dá)及初步鑒定[J];醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào);2008年03期

中國(guó)重要會(huì)議論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 王懷鵬;蒲小勇;王行環(huán);單志新;高煒城;楊中華;李世林;羅耀雄;徐戰(zhàn)平;;巨噬細(xì)胞移動(dòng)抑制因子基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建和鑒定[A];第十五屆全國(guó)泌尿外科學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2008年

2 邱明鏈;;真核表達(dá)載體pIRES2-EGFP-hFasL的構(gòu)建及鑒定[A];2012中國(guó)器官移植大會(huì)論文匯編[C];2012年

3 吳涓涓;章曉聯(lián);;反義葡萄糖苷酶Ⅰ和分子伴侶鈣聯(lián)蛋白基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建[A];湖北省暨武漢市免疫學(xué)會(huì)第八屆學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2003年

4 田曉濱;孫立;楊述華;;克隆并構(gòu)建人骨形成蛋白-2真核表達(dá)載體[A];2006年貴州省醫(yī)學(xué)會(huì)骨科學(xué)分會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2006年

5 張燦;鞠吉雨;馮永堂;李在連;;乙肝病毒反義X基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建[A];山東免疫學(xué)會(huì)、山東微生物學(xué)會(huì)醫(yī)學(xué)微生物學(xué)專業(yè)委員會(huì)、山東省醫(yī)學(xué)會(huì)微生物學(xué)和免疫學(xué)專業(yè)委員會(huì)、山東省醫(yī)藥生物技術(shù)學(xué)會(huì)2001年學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2001年

6 李剛;王平;;人膀胱逼尿肌中腎上腺素能β_2受體基因的克隆及反義真核表達(dá)載體的構(gòu)建[A];全面建設(shè)小康社會(huì)：中國(guó)科技工作者的歷史責(zé)任——中國(guó)科協(xié)2003年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集（下）[C];2003年

7 孫立;田曉濱;胡如印;汪雷;陸延盛;;人骨形成蛋白2真核表達(dá)載體的構(gòu)建和體外表達(dá)[A];第六屆西部骨科論壇暨貴州省骨科年會(huì)論文匯編[C];2010年

8 陳治中;王曉蓓;王琳;毛曉露;陳鳳花;劉峰;胡麗華;;人T細(xì)胞免疫球蛋白粘蛋白-3基因及其融合蛋白真核表達(dá)載體的構(gòu)建和生物信息學(xué)分析[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第九次全國(guó)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議暨中國(guó)醫(yī)院協(xié)會(huì)臨床檢驗(yàn)管理專業(yè)委員會(huì)第六屆全國(guó)臨床檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室管理學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2011年

9 吳紅聯(lián);;5-脂氧化酶基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建與鑒定[A];第八次全國(guó)醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議(中華醫(yī)學(xué)會(huì)2009年醫(yī)學(xué)遺傳學(xué)年會(huì))論文摘要匯編[C];2009年

10 劉文文;趙永波;;大鼠GDNF真核表達(dá)載體構(gòu)建[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第七次全國(guó)神經(jīng)病學(xué)學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

中國(guó)重要報(bào)紙全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 張中橋;可誘導(dǎo)性真核表達(dá)載體構(gòu)建成功[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2004年

2 ;1.3倍乙型肝炎病毒全基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建及在HepG2細(xì)胞中的表達(dá)[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2003年

中國(guó)博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 張守純;p16真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其轉(zhuǎn)基因的研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2004年

2 王小芳;重組腎上腺髓質(zhì)素真核表達(dá)載體的構(gòu)建及實(shí)驗(yàn)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2004年

3 張?jiān)?SLC34A2基因真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其轉(zhuǎn)染人肺泡上皮細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2008年

4 杜德偉;丙型肝炎病毒的受體研究——B族Ⅰ型清道夫受體介導(dǎo)HCV入胞作用的研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2004年

中國(guó)碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前10條

1 辛莉;CRMP-1-phrGFP II-N真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其對(duì)突起生長(zhǎng)的調(diào)節(jié)[D];暨南大學(xué);2007年

2 呂婷婷;pHsa-miR16-shRNA真核表達(dá)載體的構(gòu)建、體外轉(zhuǎn)錄及其活性的鑒定[D];華中科技大學(xué);2009年

3 王圓圓;CRMP-5-pEGFP-C2真核表達(dá)載體的構(gòu)建及促神經(jīng)元突起生長(zhǎng)作用[D];暨南大學(xué);2009年

4 周夢(mèng)云;組織基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑-4真核表達(dá)載體的構(gòu)建和功能研究[D];蘇州大學(xué);2007年

5 朱曉西;pIRES2-EGFP-hIL-12-HSP70真核表達(dá)載體的構(gòu)建及對(duì)7402肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響[D];遵義醫(yī)學(xué)院;2011年

6 盧春生;人骨形成蛋白2和7成熟肽編碼區(qū)基因克隆和真核表達(dá)載體的構(gòu)建[D];廣州醫(yī)學(xué)院;2009年

7 班亞珂;人親磷脂酸磷脂酶A1β亞型基因的克隆與序列分析及真核表達(dá)載體的構(gòu)建[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2013年

8 張立華;人表皮生長(zhǎng)因子基因真核表達(dá)載體構(gòu)建及基因轉(zhuǎn)染[D];鄭州大學(xué);2004年

9 宋曉妍;人生長(zhǎng)激素真核表達(dá)載體的構(gòu)建及其瞬時(shí)表達(dá)[D];鄭州大學(xué);2006年

10 陳姍姍;miR-122真核表達(dá)載體的構(gòu)建、體外轉(zhuǎn)錄及其活性的鑒定[D];華中科技大學(xué);2008年

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