重組人胸腺法新的制備及其作為老年人流感疫苗免疫增強(qiáng)劑的效果評(píng)價(jià)
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【摘要】:目的采用重組技術(shù)制備重組人胸腺法新(rh Tα1),初步探討rh Tα1對(duì)老年小鼠接種流感疫苗免疫應(yīng)答效果的影響。方法用DNA重組技術(shù)構(gòu)建胸腺法新的原核表達(dá)載體p GE-Tα1,將重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化至大腸桿菌BL21中,經(jīng)高密度發(fā)酵和純化成功制備rh Tα1。老年Balb/c小鼠接種流感疫苗后,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組,實(shí)驗(yàn)組給予低、中、高劑量(0.2、0.4、0.8 mg/kg)的rh Tα1,對(duì)照組給予PBS(陰性對(duì)照組)和化學(xué)合成的胸腺法新(c Tα1 0.4 mg/kg,陽性對(duì)照組),皆皮下注射,每周2次,連續(xù)4周。動(dòng)態(tài)監(jiān)測小鼠血清中的血凝抑制(HI)抗體效價(jià),采用MTT法測定小鼠脾臟T、B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能、使用ELISA方法檢測血清細(xì)胞因子水平(IL-12,IFN-γ),并觀察脾臟形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)的變化。結(jié)果 rh Tα1的表達(dá)載體構(gòu)建成功,經(jīng)發(fā)酵和純化獲得純度95%的目的蛋白;動(dòng)物實(shí)驗(yàn)顯示,與陰性對(duì)照組比較,rh Tα1各濃度組與c Tα1組均能提高老年鼠的HI抗體效價(jià),提高脾臟T、B淋巴細(xì)胞轉(zhuǎn)化功能以及血清中IL-12、IFN-γ的表達(dá)水平,脾臟組織病理形態(tài)明顯改善,而且rh Tα1中高劑量組與c Tα1組效果相近(P0.05)。結(jié)論使用DNA重組技術(shù)成功制備rh Tα1,且rh Tα1能夠提高老年小鼠流感疫苗接種的免疫效果,為開發(fā)適合老年人的疫苗免疫應(yīng)答增強(qiáng)劑提供了理論基礎(chǔ)。
【作者單位】: 天津大學(xué)化工學(xué)院制藥工程系;北京諾思蘭德生物技術(shù)股份有限公司;吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院;
【關(guān)鍵詞】: 重組人胸腺法新 基因表達(dá) 流感疫苗 疫苗免疫增強(qiáng)劑 血凝抑制試驗(yàn)
【分類號(hào)】:R392
【正文快照】: 疫苗是預(yù)防傳染病最有效的手段,對(duì)于免疫個(gè)體,如果接種疫苗后不能有效產(chǎn)生抗體即接種失敗,則極易感染傳染病;對(duì)于免疫人群,只有當(dāng)產(chǎn)生免疫的人數(shù)達(dá)到人群的80%以上時(shí),整個(gè)人群形成一個(gè)免疫屏障,達(dá)到群體免疫,才能有效防止疾病的傳播和流行。而老年人及其他免疫低下人群對(duì)流感
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,本文編號(hào):1109547
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