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模擬腦組織生物力學(xué)環(huán)境下溫敏臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的分化特性研究

發(fā)布時間:2017-10-25 07:04

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【摘要】:目的模擬腦組織彈性模量制備相應(yīng)二維培養(yǎng)基,比較亞低溫聯(lián)合溫敏臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(ts UC)與常溫下臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UC)的分化特性。方法應(yīng)用單、雙丙烯酰胺的聚合作用,制備彈性模量為0.5 k Pa的聚丙烯酰胺(PA)水凝膠,用于模擬腦組織的生物力學(xué)環(huán)境,并測其彈性模量。從新生兒臍帶中分離培養(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞,通過感染攜溫度敏感型猿猴病毒40大T抗原(ts-SV40LT)基因的逆轉(zhuǎn)錄病毒來制備ts UC。實(shí)驗(yàn)分為3組:UC+常溫+玻片組(A組)、UC+常溫+0.5 k Pa組(B組)、ts UC+亞低溫+0.5 k Pa組(C組)。動態(tài)觀察各組細(xì)胞的生長情況和形態(tài)變化,并于7 d后行細(xì)胞免疫熒光檢測各組細(xì)胞的分化水平并計算分化神經(jīng)元的軸突長度。結(jié)果 PA水凝膠彈性模量的檢測結(jié)果為(0.50±0.03)k Pa。B、C兩組部分細(xì)胞出現(xiàn)細(xì)長的胞突,并存在β-tubulinⅢ陽性細(xì)胞,A組細(xì)胞鏡下無明顯神經(jīng)元形態(tài),也無β-tubulinⅢ陽性表達(dá)。B、C兩組的神經(jīng)元分化率以及熒光下軸突長度均明顯高于A組,但組間差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論在模擬腦組織彈性模量的環(huán)境中,ts UC具有向神經(jīng)元分化的能力,可應(yīng)用于亞低溫治療下腦損傷修復(fù)的細(xì)胞移植研究。
【作者單位】: 武警后勤學(xué)院附屬醫(yī)院腦科中心腦創(chuàng)傷與神經(jīng)疾病研究所天津市神經(jīng)創(chuàng)傷修復(fù)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】溫敏臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 聚丙烯酰胺水凝膠 彈性模量 生物力學(xué)
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81271392,81471275,81401067) 天津市應(yīng)用基礎(chǔ)與前沿技術(shù)研究計劃(14JCQNJC10200)
【分類號】:R329.2
【正文快照】: 細(xì)胞生物學(xué)性能的調(diào)控機(jī)制與細(xì)胞的生物力學(xué)特性有關(guān),包括細(xì)胞內(nèi)部的收縮力、細(xì)胞與基質(zhì)之間的牽張力、細(xì)胞與細(xì)胞之間的相互作用力等[1-2]。體外培養(yǎng)干細(xì)胞時,培養(yǎng)基質(zhì)的彈性模量是細(xì)胞生物力學(xué)的一個重要體現(xiàn),且對干細(xì)胞分化具有調(diào)節(jié)作用[3-5]。人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(umbilica

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