本文關(guān)鍵詞：人血管內(nèi)皮鈣黏蛋白5單克隆抗體的制備及應(yīng)用

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【摘要】：目的制備并鑒定人血管內(nèi)皮鈣黏蛋白5(VECDH5)的單克隆抗體(m Ab)。方法用重組原核人VECDH5蛋白免疫BALB/c小鼠,利用雜交瘤技術(shù)進行細(xì)胞融合;間接ELISA篩選陽性克隆,得到穩(wěn)定分泌抗VECDH5抗體的雜交瘤細(xì)胞株,ELISA測定其效價;Western blot法、流式細(xì)胞術(shù)、免疫熒光細(xì)胞化學(xué)染色、免疫組織化學(xué)染色鑒定其特異性及抗原表位。結(jié)果制備并獲得1株可分泌特異性抗VECDH5的雜交瘤細(xì)胞株(2C11)。ELISA測定腹水效價高達(dá)1∶10 000。多種方法均證實該抗體能特異性識別人VECDH5蛋白,并可在上述不同方法中應(yīng)用。經(jīng)抗原表位鑒定,研究制備的2C11識別的氨基酸序列為LDREVVPWYNLTVEA。結(jié)論成功制備了親和力高、特異型好的抗人VECDH5的m Ab。
【作者單位】： 蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院;江蘇省血液研究所;蘇州大學(xué)唐仲英血液學(xué)研究中心;
【關(guān)鍵詞】： 血管內(nèi)皮鈣黏蛋白(VECDH) 單克隆抗體 鑒定
【基金】：江蘇高校優(yōu)勢學(xué)科建設(shè)工程資助(YX21100214)
【分類號】：R392.11
【正文快照】： 血管內(nèi)皮鈣黏蛋白5(vascular endothelial cadherin 5,VECDH5)是內(nèi)皮細(xì)胞特異性鈣黏蛋白,主要分布在細(xì)胞連接處,在正常血管發(fā)生、保持血管內(nèi)皮完整性、腫瘤細(xì)胞的生長抑制以及細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等各個過程中均起著重要作用。VECDH5作為黏附分子家族中的一員,具有Ca2+介導(dǎo)的親同源

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本文編號：1091195