本文關(guān)鍵詞：人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞體外傳代培養(yǎng)對染色體核型的影響

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【摘要】：目的:分離培養(yǎng)人羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞(hAMSCs)并進(jìn)行體外長期傳代培養(yǎng),通過對連續(xù)傳代的細(xì)胞形態(tài)、膜表面標(biāo)志、增殖、分化特性以及染色體核型進(jìn)行研究,以觀察體外培養(yǎng)對該細(xì)胞的影響,為其儲備和臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。方法:無菌條件下從新鮮人胎盤組織分離羊膜,采用組織貼壁法分離培養(yǎng)hAMSCs,并對原代細(xì)胞～P11代細(xì)胞利用流式細(xì)胞技術(shù)檢測其膜表面標(biāo)志物;取P3～P4代細(xì)胞向神經(jīng)細(xì)胞和成骨細(xì)胞誘導(dǎo),免疫組化染色、PCR檢測基因表達(dá)情況;采用染色體G顯帶法制備染色體核型。結(jié)果:hAMSCs形態(tài)似長梭型,呈流水狀生長,細(xì)胞活性高,凍存復(fù)蘇后仍能保持正常形態(tài),并可在體外穩(wěn)定擴(kuò)增,細(xì)胞生長曲線呈"S"型;細(xì)胞高表達(dá)CD90、CD73、CD44、CD105;細(xì)胞經(jīng)誘導(dǎo)后可以向神經(jīng)細(xì)胞和成骨細(xì)胞分化,神經(jīng)元特異性烯醇化酶和成骨細(xì)胞礦化結(jié)節(jié)檢測為陽性,PCR檢測巢蛋白和骨橋蛋白基因表達(dá)為陽性;P3～P10代的hAMSCs染色體核型均為正常二倍體核型。結(jié)論:hAMSCs在體外經(jīng)數(shù)代培養(yǎng)后能保持間充質(zhì)干細(xì)胞的外顯和遺傳特性,并且未見染色體核型異常改變。
【作者單位】： 貴州醫(yī)科大學(xué)組織工程與干細(xì)胞實驗中心;貴州醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)學(xué)院兒科學(xué)教研室;貴州醫(yī)科大學(xué)免疫學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】： 羊膜間充質(zhì)干細(xì)胞 傳代培養(yǎng) 核型
【基金】：貴州省科學(xué)技術(shù)廳貴陽醫(yī)學(xué)院聯(lián)合基金計劃項目黔科合LH字[2014]7078
【分類號】：R329
【正文快照】： 間充質(zhì)干細(xì)胞(MSCs)是干細(xì)胞家族的重要成員,來源于發(fā)育早期的中胚層和外胚層,是具有自我更新和多向分化潛能的成體干細(xì)胞,因具有組織修復(fù)、免疫調(diào)控、支持造血、免疫原性低、易于分離培養(yǎng)、體外能大量擴(kuò)增及凍存等特點而受到關(guān)注,是干細(xì)胞研究及應(yīng)用的熱點[1]。細(xì)胞治療的安

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