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體外培養(yǎng)中性粒細(xì)胞的活力、凋亡、活性氧變化趨勢研究

發(fā)布時間:2017-10-22 06:06

  本文關(guān)鍵詞:體外培養(yǎng)中性粒細(xì)胞的活力、凋亡、活性氧變化趨勢研究


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【摘要】:目的:探討中性粒細(xì)胞分離培養(yǎng)后細(xì)胞活力、凋亡、活性氧(Reactive oxygen species,ROS)生成的變化。方法:采用密度梯度離心法分離健康人外周血中性粒細(xì)胞,在含10%胎牛血清的培養(yǎng)液于37℃、5%CO2飽和濕度的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)至96 h。應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測0、24、48、72和96 h的細(xì)胞活力、凋亡;在0、12、24和36 h檢測ROS的生成。結(jié)果:中性粒細(xì)胞在體外培養(yǎng)24 h內(nèi),細(xì)胞活力可保持90%以上,24 h凋亡細(xì)胞比例與0 h相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05),在體外培養(yǎng)72 h后細(xì)胞活力明顯下降和細(xì)胞凋亡增加,在體外培養(yǎng)96 h細(xì)胞幾乎全部死亡;中性粒細(xì)胞產(chǎn)生ROS的能力在12 h已顯著下降。結(jié)論:中性粒細(xì)胞在24 h內(nèi)處于相對穩(wěn)定的狀態(tài),細(xì)胞活力大于90%,凋亡細(xì)胞數(shù)變化不明顯,可用于一般體外的實驗研究。然而,中性粒細(xì)胞在體外培養(yǎng)12 h產(chǎn)生ROS的能力顯著下降,ROS功能實驗要在細(xì)胞分離后立即進(jìn)行。
【作者單位】: 徐州醫(yī)學(xué)院附屬連云港醫(yī)院中心實驗室;南京醫(yī)科大學(xué)康達(dá)學(xué)院臨床診斷學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】中性粒細(xì)胞 細(xì)胞活力 細(xì)胞凋亡 活性氧
【分類號】:R329.2
【正文快照】: J Exp Hematol 2016;(5):1547-1551中性粒細(xì)胞(neutrophilis),約占白細(xì)胞總數(shù)的50%-70%,是機(jī)體免疫系統(tǒng)抵御細(xì)菌感染的第一道防線,對炎癥的發(fā)生、發(fā)展和轉(zhuǎn)歸起到了關(guān)鍵作用[1]。目前對中性粒細(xì)胞的研究主要依賴于體外實驗,通過藥物等作用于外周血中分離的中性粒細(xì)胞,檢測其吞

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