腸道病毒71型毒株體外不同溫度連續(xù)傳代其生物學(xué)特性變化研究
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【摘要】:目的探究腸道病毒71型(EV-A71)FY23-K株在不同溫度下連續(xù)傳代對其生物學(xué)特性的影響,旨在獲得EV-A71的減毒候選株。方法在33℃條件下進(jìn)行FY23-K株克隆篩選,之后分別在33℃及35℃下連續(xù)傳代,并進(jìn)行病毒生長增殖特性、乳鼠致病性及在小鼠體內(nèi)的免疫原性檢測,對比分析其各項生物學(xué)特性的變化。結(jié)果挑選出感染性滴度較高的6個克隆,在33℃條件下連續(xù)傳代后發(fā)現(xiàn),其感染性滴度逐漸降低,且相同接種條件下,達(dá)到75%病變程度的收獲時間隨代次的增加逐漸延長,至26代后,接種至第8天細(xì)胞病變程度只達(dá)到40%。而在35℃條件下連續(xù)傳代的病毒能夠穩(wěn)定增殖,保持良好的生長特性,毒株感染性滴度6.5lg CCID50/ml;35℃?zhèn)鞔蠖局甑拿庖咴粤己?6株克隆株有4株樣品的滅活抗原免疫小鼠后抗體的陽轉(zhuǎn)率可達(dá)100.0%,GMT可達(dá)1∶128,最高的中和抗體效價為1∶512;活病毒免疫小鼠抗體陽轉(zhuǎn)率達(dá)88.9%以上,中和抗體效價均1∶16;傳代樣品攻擊乳鼠后,乳鼠無發(fā)病、死亡情況,其腦、脊髓也未產(chǎn)生明顯病理性損傷,僅在肌肉組織細(xì)胞間隙發(fā)現(xiàn)少量的炎性細(xì)胞浸潤,在腦前額葉出現(xiàn)數(shù)個膠質(zhì)小結(jié)。結(jié)論 FY-23K克隆株在35℃低溫連續(xù)傳代后有穩(wěn)定的生長特性和良好的免疫原性,對乳鼠未表現(xiàn)出明顯致病性,可作為EV-A71減毒活疫苗進(jìn)一步研究的候選毒株。
【作者單位】: 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所云南省重大傳染病疫苗工程技術(shù)研究中心云南省重大傳染病疫苗研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【關(guān)鍵詞】: 手足口病 腸道病毒型 減毒活疫苗
【基金】:云南省科技計劃(2015BC008)
【分類號】:R373
【正文快照】: 朱凡麗,李華,謝天宏,楊婷,宋霞,王璽,沈冬,劉正玲,岳磊,謝忠平中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所云南省重大傳染病疫苗工程技術(shù)研究中心云南省重大傳染病疫苗研發(fā)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,昆明650118Corresponding author:XIE Zhong-ping,E-mail:zxp218@126.com腸道病毒71型(en
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,本文編號:1073600
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