發(fā)布時間：2017-10-21 13:23

  本文關鍵詞：腸道病毒71型毒株體外不同溫度連續(xù)傳代其生物學特性變化研究

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【摘要】：目的探究腸道病毒71型(EV-A71)FY23-K株在不同溫度下連續(xù)傳代對其生物學特性的影響,旨在獲得EV-A71的減毒候選株。方法在33℃條件下進行FY23-K株克隆篩選,之后分別在33℃及35℃下連續(xù)傳代,并進行病毒生長增殖特性、乳鼠致病性及在小鼠體內的免疫原性檢測,對比分析其各項生物學特性的變化。結果挑選出感染性滴度較高的6個克隆,在33℃條件下連續(xù)傳代后發(fā)現(xiàn),其感染性滴度逐漸降低,且相同接種條件下,達到75%病變程度的收獲時間隨代次的增加逐漸延長,至26代后,接種至第8天細胞病變程度只達到40%。而在35℃條件下連續(xù)傳代的病毒能夠穩(wěn)定增殖,保持良好的生長特性,毒株感染性滴度6.5lg CCID50/ml;35℃?zhèn)鞔蠖局甑拿庖咴粤己?6株克隆株有4株樣品的滅活抗原免疫小鼠后抗體的陽轉率可達100.0%,GMT可達1∶128,最高的中和抗體效價為1∶512;活病毒免疫小鼠抗體陽轉率達88.9%以上,中和抗體效價均1∶16;傳代樣品攻擊乳鼠后,乳鼠無發(fā)病、死亡情況,其腦、脊髓也未產生明顯病理性損傷,僅在肌肉組織細胞間隙發(fā)現(xiàn)少量的炎性細胞浸潤,在腦前額葉出現(xiàn)數(shù)個膠質小結。結論 FY-23K克隆株在35℃低溫連續(xù)傳代后有穩(wěn)定的生長特性和良好的免疫原性,對乳鼠未表現(xiàn)出明顯致病性,可作為EV-A71減毒活疫苗進一步研究的候選毒株。
【作者單位】： 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院醫(yī)學生物學研究所云南省重大傳染病疫苗工程技術研究中心云南省重大傳染病疫苗研發(fā)重點實驗室;
【關鍵詞】： 手足口病 腸道病毒型 減毒活疫苗
【基金】：云南省科技計劃(2015BC008)
【分類號】：R373
【正文快照】： 朱凡麗,李華,謝天宏,楊婷,宋霞,王璽,沈冬,劉正玲,岳磊,謝忠平中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院醫(yī)學生物學研究所云南省重大傳染病疫苗工程技術研究中心云南省重大傳染病疫苗研發(fā)重點實驗室,昆明650118Corresponding author:XIE Zhong-ping,E-mail:zxp218@126.com腸道病毒71型(en

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本文編號：1073600