巴泰病毒實時熒光定量PCR檢測方法的建立
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【摘要】:目的利用Taq Man實時熒光定量PCR技術(shù),建立巴泰病毒(Batai virus,BATV)實時熒光定量PCR檢測方法。方法根據(jù)Gen Bank發(fā)表的BATV基因序列資料分析結(jié)果,在其S片段編碼非結(jié)構(gòu)蛋白的基因區(qū)段設(shè)計BATV特異引物與探針,利用不同科、屬的13株病毒核酸驗證方法特異性,利用體外轉(zhuǎn)錄的定量RNA標準品建立基因拷貝數(shù)定量分析模型,重復(fù)實驗檢驗方法的穩(wěn)定性。結(jié)果引物與探針具有良好的特異性,定量分析模型的靈敏度為10拷貝/μl,同一樣品重復(fù)檢測循環(huán)閾值的變異系數(shù)均2.50%。結(jié)論建立了一種特異、靈敏、高效的BATV一步法Taq Man實時熒光定量PCR檢測方法,為今后該病毒的檢測與研究工作提供技術(shù)手段。
【作者單位】: 中國疾病預(yù)防控制中心病毒病預(yù)防控制所;
【關(guān)鍵詞】: 巴泰病毒 實時熒光定量PCR 分子檢測
【基金】:國家科技重大專項課題(2013ZX10004-101)~~
【分類號】:R373.3;R440
【正文快照】: 巴泰病毒(Batai virus,BATV)是布尼亞病毒科(Bnuyaviridae)布尼亞病毒屬(Orthobunyavirus)布尼亞姆韋拉(Bunyamwera)血清組的成員,主要分布于亞洲和歐洲,以庫蚊和按蚊為主要傳播媒介,具有廣泛的動物宿主,感染后可引起人類發(fā)熱和病毒性腦炎癥狀[1-4]。BATV于1955年首先分離自馬
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