本文關(guān)鍵詞：單個(gè)人造血干細(xì)胞體外培養(yǎng)體系用于小分子化合物篩選

  更多相關(guān)文章： 單細(xì)胞 造血干細(xì)胞 小分子 化合物篩選

【摘要】：目的:探索一種高效且穩(wěn)定驗(yàn)證小分子化合物對(duì)人造血干細(xì)胞(hHSC)調(diào)控作用的體系和方法。方法:用流式細(xì)胞術(shù)結(jié)合目前對(duì)h HSC表面標(biāo)記的研究,優(yōu)化h HSC分選過(guò)程,將干細(xì)胞培養(yǎng)精確至單個(gè)細(xì)胞水平,進(jìn)而研究小分子化合物對(duì)細(xì)胞干性的影響。用已發(fā)表的對(duì)人HSC有擴(kuò)增作用的小分子化合物SR1及UM171處理單個(gè)h HSC,14 d后進(jìn)行細(xì)胞表型流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)以及細(xì)胞涂片觀察形態(tài),同時(shí)利用CFC和CAFC驗(yàn)證培養(yǎng)后細(xì)胞造血功能的變化。結(jié)果:多細(xì)胞培養(yǎng)中2種小分子化合物及其組合作用與已知研究相符,并由此獲得化合物使用濃度。多參數(shù)單細(xì)胞分選(CD34+CD38-CD45RA-CD90+CD49f+)及體外培養(yǎng)結(jié)果與多細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)果一致,細(xì)胞形態(tài)分析結(jié)果與流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果一致。此外,CFC和CAFC體外造血功能實(shí)驗(yàn)中,處理組細(xì)胞集落形成能力顯著高于對(duì)照組(P0.05)。結(jié)論:建立了一個(gè)周期短且擴(kuò)增作用穩(wěn)定的單個(gè)hHSC體外培養(yǎng)體系和驗(yàn)證小分子化合物作用的方法,為小分子化合物篩選建立了可靠的平臺(tái)并為以后的h HSC擴(kuò)增研究打下基礎(chǔ)。
【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院血液病醫(yī)院 血液學(xué)研究所 實(shí)驗(yàn)血液學(xué)國(guó)家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院 北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院血液病醫(yī)院口腔科;
【關(guān)鍵詞】： 單細(xì)胞 造血干細(xì)胞 小分子 化合物篩選
【分類(lèi)號(hào)】：R329.2
【正文快照】： J Exp Hematol 2016;(3):845-851造血干細(xì)胞(hematopoietic stem cell,HSC)具有自我更新和多向分化的潛能,在保持干細(xì)胞池相對(duì)穩(wěn)定的同時(shí)又可增殖分化成造血系統(tǒng)中各系細(xì)胞[1]。由于血細(xì)胞群體的高度異質(zhì)性以及HSC的稀少為HSC的研究增加了巨大的困難,因此HSC維持長(zhǎng)期自我更新

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