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云南省惡性瘧原蟲Pfcrt基因exon2區(qū)72~76編碼序列多態(tài)性的分析

發(fā)布時間:2017-10-16 01:11

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【摘要】:目的分析云南省惡性瘧病例中惡性瘧原蟲氯喹抗性轉(zhuǎn)運蛋白(Plasmodium falciparum chloroquine resistant transporter,Pfcrt)基因exon2區(qū)72~76編碼(簡稱72~76編碼)序列的多態(tài)性,為了解云南省抗氯喹惡性瘧的流行現(xiàn)狀提供依據(jù)。方法 2012年8月至2015年9月,從云南省除迪慶、文山、昭通以外的13個州(市)收集惡性瘧病例的濾紙血樣和相關(guān)信息,通過流行病學(xué)調(diào)查判定感染來源地,根據(jù)中國疾病預(yù)防控制中心傳染病報告信息管理系統(tǒng)疫情登記確認(rèn)病例發(fā)現(xiàn)地。用巢式PCR擴增患者血樣中的惡性瘧原蟲Pfcrt基因exon2區(qū)并測序,用MEGA 5.04分析72~76編碼序列的多態(tài)性,計算變異位點、序列間遺傳距離等。用IBM SPSS Statistics 21軟件對分類變量72~76編碼多態(tài)在各人群中的構(gòu)成比進行分析。結(jié)果從2012年8月至2015年9月,共收集惡性瘧病例血樣232份,病例感染來源地有云南、非洲、緬甸等流行區(qū)。其中210份血樣巢式PCR擴增陽性,序列分析顯示,72~76編碼序列存在CVMNK氯喹敏感型和CVIET、SVMNT、CVMNT氯喹抗性型,所占比例分別為15.2%(32/210)、76.2%(160/210)、6.7%(14/210)和1.9%(4/210)。氯喹敏感性型CVMNK在19~55歲、農(nóng)民、感染地為東南亞(緬甸161例、柬埔寨1例)等病例中檢出的比例分別為100%(32/32)、46.9%(15/32)和59.4%(19/32),高于同組其它病例的0、31.3%(10/32)和37.5%(12/32)(χ~2=13.674,8.478,6.292,P0.05);氯喹抗性型CVIET、SVMNT在感染地為緬甸和柬埔寨的病例中的比例分別為81.3%(130/160)和78.6%(11/14),高于云南感染病例的6.3%(10/160)和21.4%(3/14)(χ~2=6.519,6.620,P0.05);非洲感染病例中的CVIET比例為12.5%(20/160),未檢測到SVMNT型。210條Pfcrt基因exon2區(qū)DNA序列的同源位點為145 bp,保守位點占95.2%(138/145),變異位點占4.8%(7/145),序列間遺傳距離為0.000~0.036,平均為(0.012±0.005),3種氯喹抗性型CVIET、SVMNT、CVMNT與敏感型CVMNK的遺傳距離平均分別為(0.029±0.015)、(0.021±0.013)和(0.014±0.001);檢出氯喹抗性型瘧原蟲的178例病例分布在云南的13個州(市),其中,與緬甸接壤的德宏、保山、臨滄3個州(市)以及云南中部的昆明市,檢出氯喹抗性型的比例分別為51.7%(92/178)、24.7%(44/178)、5.6%(10/178)和4.5%(8/178),居全省前4位。結(jié)論云南省惡性瘧病例感染惡性瘧原蟲的Pfcrt基因exon2區(qū)72~76編碼序列存在3種氯喹抗性型,氯喹抗性型惡性瘧原蟲的病例分布在全省81.3%(13/16)的州(市)。
【作者單位】: 北京大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院;云南省寄生蟲病防治所 云南省瘧疾研究中心 云南省蟲媒傳染病防控研究重點實驗室;
【關(guān)鍵詞】惡性瘧原蟲 氯喹抗性 基因型 多態(tài) 分析
【基金】:上海市2015年度“科技創(chuàng)新行動計劃”國內(nèi)合作項目(No.15495800400)~~
【分類號】:R382
【正文快照】: 作者單位:1北京大學(xué)公共衛(wèi)生學(xué)院2013級1班(本科),北京100191;2云南省寄生蟲病防治所,云南省瘧疾研究中心,云南省蟲媒傳染病防控研究重點實驗室,普洱665000云南省是《中國消除瘧疾行動計劃(2010-2020年)》[1]的重點地區(qū),在瘧疾控制過程中,除認(rèn)真落實抗瘧措施外,還需關(guān)注氯喹抗

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