本文關(guān)鍵詞：以分泌型熒光素酶為報(bào)告基因的單輪感染流感病毒的構(gòu)建

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【摘要】：目的構(gòu)建以分泌型熒光素酶為報(bào)告基因的單輪感染流感病毒用于藥物作用機(jī)制的快速鑒別。方法通過(guò)使用分泌型熒光素酶(Gluc)序列替代流感病毒HA基因,并利用表達(dá)質(zhì)粒反式提供HA蛋白,借助甲型流感病毒W(wǎng)SN反向遺傳學(xué)產(chǎn)毒系統(tǒng),構(gòu)建帶有報(bào)告系統(tǒng)的單輪感染流感病毒。結(jié)果首輪接種單輪感染流感病毒的細(xì)胞上清中可以檢測(cè)到Gluc信號(hào),但檢測(cè)不到病毒滴度,而在第二輪感染的細(xì)胞上清中檢測(cè)不到Gluc信號(hào),表明該單輪感染病毒在感染過(guò)程中能夠分泌Gluc蛋白并且不能產(chǎn)生具有感染性的子代病毒顆粒。通過(guò)對(duì)復(fù)制動(dòng)力學(xué)和時(shí)相的觀察,明確了單輪感染病毒的生活周期,同時(shí)結(jié)合4種已知作用機(jī)制的抗流感藥物的阻斷實(shí)驗(yàn)結(jié)果,證明該系統(tǒng)可以用來(lái)快速、有效地鑒別藥物的作用機(jī)制。結(jié)論成功構(gòu)建了以分泌型熒光素酶為報(bào)告基因的單輪感染流感病毒,該系統(tǒng)可以用于抗病毒藥物作用機(jī)制的快速鑒別。
【作者單位】： 中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院醫(yī)藥生物技術(shù)研究所免疫生物學(xué)室;
【關(guān)鍵詞】： 流感病毒A型 藥物評(píng)價(jià) 臨床前 單輪感染病毒 Gluc報(bào)告基因
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(81401675)
【分類號(hào)】：R373.13
【正文快照】： 甲型流感病毒是急性呼吸道傳染性疾病的主要病原體之一。臨床上預(yù)防和治療流感的手段主要有疫苗和抗流感藥物,但是由于流感病毒具有極強(qiáng)的重組變異和抗原漂移能力,嚴(yán)重地限制了流感疫苗的免疫保護(hù)作用。同時(shí),目前的流感病毒流行株對(duì)臨床一線抗流感藥物也產(chǎn)生了不同程度的耐藥[

【相似文獻(xiàn)】

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