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雙抗體夾心ELISA定量檢測狂犬病病毒糖蛋白方法的建立及初步應用

發(fā)布時間:2017-10-13 07:19

  本文關鍵詞:雙抗體夾心ELISA定量檢測狂犬病病毒糖蛋白方法的建立及初步應用


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【摘要】:目的定量檢測狂犬病病毒病毒樣顆粒糖蛋白含量。方法以狂犬病病毒糖蛋白單克隆抗體作為捕獲抗體,狂犬病病毒多克隆抗體作為檢測抗體,標準品為以細胞半數(shù)感染量(TCID50)準確定量的狂犬病病毒SRV9毒株病毒液,建立檢測狂犬病病毒糖蛋白(RABV-GP)含量的雙抗體夾心ELISA檢測方法,對各反應條件進行優(yōu)化并分析其特異性、重復性和靈敏度。結果雙抗體夾心ELISA定量檢測方法最佳工作條件為:狂犬病病毒糖蛋白蛋白單克隆抗體包被濃度為2.5μg/ml,4℃包被過夜;1%BSA,37℃封閉2h;狂犬病病毒多克隆抗體1∶200稀釋,37℃孵育1.5h;酶標二抗1∶5 000稀釋,37℃孵育1h;TMB室溫避光顯色30min。結論該方法可特異性定量檢測狂犬病病毒,與犬細小病毒、犬瘟熱病毒和犬傳染性肝炎病毒均不發(fā)生反應。該方法線性檢測范圍為1×104~1.0×107 TCID50/ml,平均批內變異系數(shù)小于6%,平均批間變異系數(shù)小于8%。
【作者單位】: 吉林農業(yè)大學研究生學院;軍事醫(yī)學科學院軍事獸醫(yī)研究所吉林省人獸共患病預防與控制重點實驗室;江蘇省動物重要疫病與人獸共患病防控協(xié)同創(chuàng)新中心;長春西諾生物科技有限公司;吉林大學動物醫(yī)學學院;海城市種畜禽監(jiān)督管理站;
【關鍵詞】狂犬病病毒 雙抗體夾心ELISA 糖蛋白 抗原定量檢測
【基金】:寵物疫病快速診斷與疫苗研究與示范(201303042) 動物狂犬病快速診斷與有效疫苗研究(201103032)
【分類號】:R392-33
【正文快照】: ***狂犬病(rabies)是一種由狂犬病毒(rabies virus,RABV)引起的侵害中樞神經系統(tǒng)的人畜共患傳染病,致死率極高,全世界每年至少6萬人死于該病[1]。大多數(shù)狂犬病病例發(fā)生于非洲和亞洲,病犬為主要傳染源[2-3]?袢摲诙陶邘滋,長者達十余年乃至數(shù)十年,發(fā)病后幾乎100%死亡,

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據庫 前10條

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3 王玉琳,封多佳,呂宏亮,李薇,馬超,魏至棟;雙抗體夾心ELISA法檢測狂犬病疫苗抗原活性組分[J];微生物學免疫學進展;1999年03期

4 徐曉鵬;向軍儉;李貴生;鄧寧;唐勇;王宏;楊紅宇;;雙抗體夾心ELISA檢測堿性成纖維細胞生長因子[J];細胞與分子免疫學雜志;2006年02期

5 童鐵鋼;白宇;張維軍;王群;劉光亮;徐樹蘭;吳東來;;檢測馬白細胞介素-18雙抗體夾心ELISA方法的建立[J];細胞與分子免疫學雜志;2009年04期

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8 崔文廣;楊屹;常軍亮;井偉東;張秀霞;苗麗;丁麗麗;周長軍;郭秀俠;;狂犬病病毒抗原定量雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立及應用[J];中國生物制品學雜志;2012年12期

9 張加利;蔡芳;高強;宋莉莉;于丹;桑建利;;牛血清白蛋白單克隆抗體的篩選與雙抗體夾心ELISA檢測方法的建立[J];中國生物制品學雜志;2008年11期

10 侯緒鳳;趙會林;;檢測重組人血小板生成素含量的改良雙抗體夾心ELISA方法的建立[J];中國生物制品學雜志;2008年08期

中國碩士學位論文全文數(shù)據庫 前3條

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3 徐修禮;廣譜抗LPS-McAb的交叉反應性及內毒素定量雙抗體夾心ELISA的建立[D];第四軍醫(yī)大學;2001年

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本文編號:1023523

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