本文關(guān)鍵詞：體外擴(kuò)增的Vγ9Vδ2T細(xì)胞抗H1N1流感病毒效應(yīng)的研究

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【摘要】：目的探討帕米磷酸鈉(PAM)體外擴(kuò)增培養(yǎng)的人外周血Vγ9Vδ2 T細(xì)胞對(duì)感染流感病毒H1N1的人肺上皮細(xì)胞A549的細(xì)胞毒效應(yīng)。方法 PAM和IL-2聯(lián)合刺激培養(yǎng)健康成人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)10~14 d,免疫磁珠分選法純化得到Vγ9Vδ2 T細(xì)胞,再將Vγ9Vδ2 T細(xì)胞與感染流感病毒的A549細(xì)胞按不同的效靶比(E∶T)接觸共育或按E∶T=20∶1非接觸共育6 h。流式細(xì)胞分析術(shù)檢測A549的存活率及Vγ9Vδ2 T細(xì)胞穿孔素(perforin)的表達(dá)情況,收集培養(yǎng)上清檢測流感病毒的滴度,提取培養(yǎng)上清及A549細(xì)胞的總RNA,實(shí)時(shí)熒光定量檢測流感病毒基質(zhì)蛋白M1基因的表達(dá)情況。結(jié)果 PAM在體外能有效活化并擴(kuò)增Vγ9Vδ2 T細(xì)胞。Vγ9Vδ2 T細(xì)胞對(duì)感染流感病毒的A549細(xì)胞具有較強(qiáng)的殺傷作用,且隨E∶T的升高而增大,在E∶T=20∶1時(shí),Vγ9Vδ2 T細(xì)胞能殺傷60%的感染了流感病毒的A549細(xì)胞。接觸共育組的A549細(xì)胞殺傷率明顯高于非接觸共育組(P0.05)。Vγ9Vδ2 T細(xì)胞經(jīng)流感病毒感染后Perforin的表達(dá)明顯上調(diào)。接觸共育組的病毒復(fù)制也明顯受到抑制(P0.05)。結(jié)論 PAM刺激擴(kuò)增的Vγ9Vδ2 T細(xì)胞能有效殺傷感染流感病毒的人肺上皮細(xì)胞A549,其效應(yīng)機(jī)制依賴于兩者細(xì)胞間的接觸。
【作者單位】： 四川大學(xué)華西第二醫(yī)院出生缺陷與相關(guān)婦兒疾病教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;成都市血液中心;四川大學(xué)華西第二醫(yī)院兒科;
【關(guān)鍵詞】： VγVδT細(xì)胞 帕米磷酸鈉 流感病毒 A細(xì)胞
【基金】：國家自然科學(xué)基金(81471848)
【分類號(hào)】：R373.13
【正文快照】： (陶于洪);610041,成都市血液中心(鞏天祥)γδT細(xì)胞是人固有免疫系統(tǒng)的重要組成部分,表達(dá)有限的多樣性TCR受體[1]。同時(shí)γδT細(xì)胞又具有免疫記憶及適應(yīng)性免疫的特點(diǎn)。非MHC限制性的識(shí)別模式讓其參與了機(jī)體免疫應(yīng)答的早期反應(yīng),因此,γδT細(xì)胞被視為免疫防御和免疫監(jiān)視的第1道重

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