本文關鍵詞：乙型副傷寒多糖蛋白結合疫苗培養(yǎng)工藝及脂多糖提取工藝摸索及優(yōu)化

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【摘要】：對乙型副傷寒多糖蛋白結合疫苗的細菌培養(yǎng)工藝及脂多糖提取工藝進行摸索及優(yōu)化。根據(jù)細菌培養(yǎng)液p H值的變化情況,采用間歇式流加補加葡萄糖代替連續(xù)流加補加葡萄糖的方式,利用10 L和100 L半自動生物反應器對乙型副傷寒沙門氏菌進行培養(yǎng),同時對細菌滅活工藝改進及優(yōu)化;在乙型副傷寒脂多糖提取過程中,探討了熱酚法提取脂多糖菌懸液制備方法、苯酚終濃度和苯酚水混合溶液的p H值及25%乙醇沉淀時所加入無水Na Ac濃度等工藝提取條件,對脂多糖的收率、核酸含量、蛋白含量的影響。結果:采用間歇式流加葡萄糖代替連續(xù)流加的方式,對乙型副傷寒沙門氏菌進行培養(yǎng),時間可縮短3~4 h,菌體收量最高;改變細菌滅活時間1 h為6 h的方法,可以降低脂多糖的核酸含量到14%;采用研磨菌體制備菌懸液、乙型副傷寒脂多糖熱酚法使用的苯酚濃度從90%提高到95%、菌懸液和苯酚混合溶液的p H值控制在6.8,25%乙醇沉淀時加入無水Na Ac終濃度為0.28 mol/L,脂多糖收率能夠達到6.17%,核酸含量可控制在12%以下,蛋白含量可控制在1.2%以下。建立了穩(wěn)定的乙型副傷寒多糖結合疫苗細菌培養(yǎng)及脂多糖提取工藝。
【作者單位】： 云南沃森生物技術股份有限公司;
【關鍵詞】： 乙型副傷寒沙門氏菌 脂多糖 葡萄糖流加方法 脂多糖提取方法 細菌滅活方法 菌懸液制備方式
【基金】：云南省疫苗工程技術研究中心人用疫苗質量評價體系構建平臺(No.2015DH035)
【分類號】：R392
【正文快照】： 副傷寒(Paratyphi)是由腸沙門菌腸亞種副傷寒病原菌引起的人腸道傳染病。菌屬為腸桿菌科沙門菌屬腸沙門菌腸亞種,甲、乙型副傷寒病原菌引起的傷寒熱的臨床表現(xiàn)與傷寒相似,但病情更輕、病程較短。乙型副傷寒見于世界各地,甲型副傷寒分布較為局限,多見于貧窮、落后、衛(wèi)生條件惡，

本文編號：1013417