miRNA-126基因敲減小鼠脾臟中免疫細(xì)胞的組成變化
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【摘要】:目的:觀察miRNA-126基因敲減(Knock down,KD)小鼠脾臟中免疫細(xì)胞組成比例變化并探討其意義。方法:Realtime PCR探針法檢測miR-126KD小鼠脾臟中miR-126表達(dá)水平,計(jì)算脾臟總細(xì)胞數(shù);HE染色觀察脾臟組織的病理學(xué)變化;流式細(xì)胞術(shù)(FACS)分別檢測脾臟中DCs細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、γδT細(xì)胞、NKT細(xì)胞,CD3~+T細(xì)胞和其亞群以及CD19~+B細(xì)胞的比例并計(jì)算細(xì)胞絕對(duì)數(shù);免疫印跡法(Western blot,WB)檢測脾臟組織中磷酸化NF-κB和磷酸化Akt的表達(dá)水平。結(jié)果:與野生型(WT)小鼠相比,miR-126KD脾組織中miR-126表達(dá)水平明顯降低(P0.05),細(xì)胞總數(shù)明顯增加(P0.05),且發(fā)生明顯病理學(xué)改變;固有免疫細(xì)胞中NK細(xì)胞的比例和細(xì)胞絕對(duì)數(shù)顯著增加(P0.05),但巨噬細(xì)胞的比例顯著降低(P0.05);適應(yīng)性免疫細(xì)胞中CD3~+T細(xì)胞和CD4~+T細(xì)胞的比例和絕對(duì)細(xì)胞數(shù)都顯著增加(P0.05),而CD19~+B細(xì)胞僅絕對(duì)數(shù)顯著增加(P0.05);最后miRNA-126KD小鼠脾臟組織的磷酸化NF-κB和磷酸化Akt水平明顯增加(P0.05)。結(jié)論:miRNA-126敲減小鼠脾臟中各免疫細(xì)胞亞群的組成發(fā)生明顯改變,可能與NF-κB和Akt信號(hào)通路傳遞變化有關(guān),為后續(xù)探討miR-126在機(jī)體免疫應(yīng)答中的作用提供了前期實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【作者單位】: 貴州省遵義醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室;
【關(guān)鍵詞】: miRNA- 基因敲減 免疫細(xì)胞 組成
【基金】:國家自然科學(xué)基金(No.31370918) 教育部新世紀(jì)優(yōu)秀人才計(jì)劃(NCET-12-0661)資助
【分類號(hào)】:R392.12
【正文快照】: 脾臟(Spleen,Sp)是哺乳動(dòng)物最大的外周免疫器官,是免疫應(yīng)答的重要部位。脾臟中含有豐富的T細(xì)胞、B細(xì)胞、樹突細(xì)胞(DC)及巨噬細(xì)胞、NK細(xì)胞等細(xì)胞亞群,它們的組成比例和數(shù)量的維持對(duì)于機(jī)體免疫應(yīng)答功能的發(fā)揮至關(guān)重要,且與多種臨床疾病的發(fā)生密切相關(guān)[1-3]。微小RNAs(microRNAs,
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,本文編號(hào):1000446
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