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腎移植術(shù)后尿中BK病毒的檢測(cè)及其臨床意義
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本站編輯：admin 日期： 2010-08-28 21:14 點(diǎn)擊：次
【中文摘要】:
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【中文摘要】多瘤病毒屬于乳多空病毒屬。其中有2種多瘤病毒可以使人類致病，它們分別是BK病毒(BKV)和JC病毒(JCV)。BKV核酸為雙鏈環(huán)狀DNA，，約有5千個(gè)堿基對(duì)。它由相對(duì)保守的編碼區(qū)和高度變異的非編碼調(diào)控(NCRR)組成。編碼區(qū)分成早期區(qū)和晚期區(qū)，早期區(qū)編碼大T和小t抗原，晚期區(qū)編碼結(jié)構(gòu)蛋白VP1、VP2、VP3和agnoprotein。 BKV的原發(fā)感染主要在兒童期，可以無癥狀或僅有輕微的呼吸道癥狀。以后病毒停留在腎臟進(jìn)入潛伏狀態(tài)。在免疫功能正常的人群，約0.5％—20％的人群多瘤病毒可以間隙性復(fù)活進(jìn)入復(fù)制循環(huán)。只有在免疫功能低下的情況下，多瘤病毒才能致病。不同的病毒株和不同程度的免疫抑制可以導(dǎo)致不同的疾病。在腎移植病人，多瘤病毒的潛伏感染率較高，這種潛伏感染多數(shù)來自于供體。約10％—60％的健康腎移植患者可能出現(xiàn)無癥狀的多瘤病毒復(fù)活，常常是間隙性的，且不影響腎功能。但如果病毒持續(xù)大量復(fù)制可以導(dǎo)致腎小管上皮細(xì)胞溶解、壞死，并出現(xiàn)基底膜的裸露。推測(cè)這些病毒顆粒可能會(huì)進(jìn)入腎間質(zhì)，從而進(jìn)入血液循環(huán)。病毒血癥表明病毒處于極度活躍狀態(tài)，有進(jìn)一步導(dǎo)致移植物損害的危險(xiǎn)。當(dāng)病毒血癥持續(xù)發(fā)展，BKV不斷在靶細(xì)胞內(nèi)復(fù)制，并破壞靶細(xì)胞就可能導(dǎo)致BKV相關(guān)性腎病(BKVAN)。BKVAN指BKV感染移植腎后產(chǎn)生了明顯的臨床癥狀如：腎功能異常等，報(bào)道約1％—8％甚至更高。常見于腎移植后免疫功能抑制較強(qiáng)烈的第一年內(nèi)，BKVAN常伴有輸尿管狹窄，淋巴囊腫，細(xì)菌性尿路感染，浙江大學(xué)碩士學(xué)位論文血尿和全身巨細(xì)胞病毒感染。由于BKVAN表現(xiàn)類似于排異反應(yīng)或藥物引起的腎毒性，因此相互混淆會(huì)引起治療時(shí)免疫抑制劑過量或不足，最終導(dǎo)致移植腎功能喪失。 BKVAN的診斷主要憑組織學(xué)和免疫組化的檢查。光鏡下表現(xiàn)為以單核淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)為主的間質(zhì)性腎炎，小管炎和細(xì)胞核內(nèi)出現(xiàn)病毒包涵體的腎小管上皮。血PCR檢測(cè)BKV DNA對(duì)BKVAN的診斷和病毒感染的隨訪均很有價(jià)值。尿中BKV的檢測(cè)是BKVAN的一種簡(jiǎn)單篩選方法。BKVAN的治療主要是細(xì)致的調(diào)節(jié)免疫抑制劑用量，新型的抗病毒藥物正在探索之中。目前國(guó)內(nèi)尚缺乏有關(guān)腎移植術(shù)后BKV感染及臨床致病的研究。本研究用PCR方法檢測(cè)腎移植術(shù)后尿中的BKV并進(jìn)行序列分析，旨在選擇一種較靈敏、特異的檢測(cè)方法，以指導(dǎo)腎移植術(shù)后BKV感染及致病的診斷和治療。 本研究從浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院腎臟病中心于1993年7月至2003年1月間施行同種異體腎移植患者中，選取61例尿樣標(biāo)本作為A組;該組男44例，女17例。并選取本中心正在血液透析等待腎移植病人的尿樣標(biāo)本30例作為B組;該組男巧例，女15例。另外采自健康志愿者的30例尿樣標(biāo)本作為C組(對(duì)照組);該組男19例，女11例。采用PCR結(jié)合測(cè)序的方法檢測(cè)各組尿樣標(biāo)本中的BKv DNA，并用SPSS10統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果，以P<0 .05為顯著性差異。 結(jié)果表明，腎移植組61例尿樣標(biāo)本中BKv DNA的檢出率為36.1%，明顯高于血透組的13.3%(P=0.024)和對(duì)照組的0.0%(p=0.000)，1例BKV陽(yáng)性腎移植患者出現(xiàn)輸尿管梗阻。而在腎移植組中發(fā)現(xiàn)排異反應(yīng)患者BKVDNA的檢出率為40.9%，未發(fā)生排異反應(yīng)患者BKV DNA的檢出率為33.3%，二者之間無顯著性差異(P=0.554)。另外在移植組中腎功能正常者和異常者BKV DNA的檢出率分別為36.0%和36.4%，二者之間差異無顯著性(P=7 .88)。 從本實(shí)驗(yàn)中，可以得出以下結(jié)論:1、本實(shí)驗(yàn)國(guó)內(nèi)首次從腎移植病人尿中檢測(cè)到BKV DNA。腎移植患者是引起B(yǎng)KV尿的高危人群。2、腎移植后有無排異史及腎功能正常與否和BKV原無相關(guān)性。3、尿BKV的檢測(cè)可用于腎移植后BKV相關(guān)性輸尿管梗阻的鑒別診斷。4、尿BKV的PCR檢測(cè)可用于BKVAN的篩選診斷。
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