近年來(lái),環(huán)境中抗生素濃度不斷提高,微生物對(duì)抗生素的抗性也在不斷增強(qiáng)。目前有大量研究表明抗生素抗性基因(Antibiotic Resistance Genes,ARGs)豐度異常增加會(huì)導(dǎo)致微生物產(chǎn)生高抗性,然而一些研究也表明ARGs突變也能導(dǎo)致微生物產(chǎn)生高抗性。環(huán)境中存在各種各樣的致基因突變物質(zhì),例如多環(huán)芳烴(Polycyclic Aromatic Hydrocarbon,PAHs),而PAHs中尤以苯并a芘(Bap)致突變效果突出。為了探究環(huán)境中致突變物質(zhì)與抗生素復(fù)合污染對(duì)ARGs的影響,本試驗(yàn)選取了具有致突變效應(yīng)的Bap和常見(jiàn)抗生素四環(huán)素TC作為污染物質(zhì),以及四環(huán)素抗性基因tetA(C)作為研究對(duì)象。本試驗(yàn)首先建立了 tetA(C)突變基因文庫(kù),并從中篩選出高抗性tetA(C)突變株,再通過(guò)測(cè)序建立tetA(C)基因突變位點(diǎn)-高抗關(guān)系密碼表。然后設(shè)置不同濃度Bap與TC處理組,培養(yǎng)供試菌株14d,結(jié)合密碼表分析Bap與TC復(fù)合污染與高抗性基因突變株出現(xiàn)概率之間的關(guān)系。最后采取真實(shí)環(huán)境中的土壤樣本,分析當(dāng)前Bap、TC污染情況以及四環(huán)素抗性基因突變情況,并分析三者之間可能存在的關(guān)系。本...

【文章頁(yè)數(shù)】：95 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１?ＴＣ在環(huán)境中的遷移途徑??Ｆｉｇ．?１－１?Ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ?ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ｐａｔｈｗａｙｓ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ??

度的抗生素污染（章強(qiáng)ｅｔ?ａｌ．，２０１４），其中污水處理廠和養(yǎng)殖場(chǎng)附近的廢水中抗生??素污染最為嚴(yán)重（Ｂｏｘａｌｌ?ｅｔ?ａｌ．，?２００５），另外在被檢測(cè)水體中ＴＣ是檢出率最高且濃度最??高的抗生素（Ｃｈｅｎ?ｅｔａｌ．，?２０１４）。??飼料（伴冇抗生素）??ｊｊ?＇［動(dòng)物....

圖１－２四環(huán)素外排泵的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｏｐｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ?ｅｆｆｌｕｘ?ｐｕｍｐ??

著增加，其中也包括ＡＲＧｓ突變，而??ＡＲＧｓ突變頻繁發(fā)生會(huì)使得微生物產(chǎn)生高抗性的概率也相應(yīng)增加。一旦微生物通過(guò)??ＡＲＧｓ突變獲得了高抗性，則當(dāng)環(huán)境中存在亞治療劑量抗生素時(shí)，相當(dāng)于增加了微生??物的抗性選擇壓力，高抗性ＡＲＧｓ突變株相較于其他菌株更易于保存下來(lái)，并逐漸在??環(huán)境....

圖２－２高保真ＰＣＲ擴(kuò)增ｔｅｔＡ（Ｃ）基因產(chǎn)物凝膠電泳圖像??Ｆｉｇ．?２－２?Ｇｅｌ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?ｈｉｇｈ?ｆｉｄｅｌｉｔｙ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｅｔＡ（Ｃ）?ｇｅｎｅ??

?四環(huán)素與苯并ａ芘復(fù)合污染對(duì)ｔａｔＡ（Ｃ）基因產(chǎn)生高抗性突變的影響???證該質(zhì)粒己導(dǎo)入供試菌株體內(nèi)，圖２－１為凝膠電泳檢測(cè)ｔｅｔＡ（Ｃ）基因的結(jié)果，１／２條帶??均顯示為陽(yáng)性。為進(jìn)一步驗(yàn)證該菌株已構(gòu)建成功，對(duì)１／２條帶的ｔｅｔＡ（Ｃ）基因片段進(jìn)行??測(cè)序，結(jié)果顯示該基因與標(biāo)準(zhǔn)ｔｅ....

圖２－１常規(guī)ＰＣＲ擴(kuò)増ｔｅｔＡ（Ｃ）基因凝膠電泳圖像??Ｆｉｇ．?２－１?Ｇｅｌ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?ｇｅｎｅｒａｌ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｅｔＡ（Ｃ）?ｇｅｎｅ??

?四環(huán)素與苯并ａ芘復(fù)合污染對(duì)ｔａｔＡ（Ｃ）基因產(chǎn)生高抗性突變的影響???證該質(zhì)粒己導(dǎo)入供試菌株體內(nèi)，圖２－１為凝膠電泳檢測(cè)ｔｅｔＡ（Ｃ）基因的結(jié)果，１／２條帶??均顯示為陽(yáng)性。為進(jìn)一步驗(yàn)證該菌株已構(gòu)建成功，對(duì)１／２條帶的ｔｅｔＡ（Ｃ）基因片段進(jìn)行??測(cè)序，結(jié)果顯示該基因與標(biāo)準(zhǔn)ｔｅ....

本文編號(hào)：3908023