近年來,環(huán)境中抗生素濃度不斷提高,微生物對抗生素的抗性也在不斷增強。目前有大量研究表明抗生素抗性基因(Antibiotic Resistance Genes,ARGs)豐度異常增加會導(dǎo)致微生物產(chǎn)生高抗性,然而一些研究也表明ARGs突變也能導(dǎo)致微生物產(chǎn)生高抗性。環(huán)境中存在各種各樣的致基因突變物質(zhì),例如多環(huán)芳烴(Polycyclic Aromatic Hydrocarbon,PAHs),而PAHs中尤以苯并a芘(Bap)致突變效果突出。為了探究環(huán)境中致突變物質(zhì)與抗生素復(fù)合污染對ARGs的影響,本試驗選取了具有致突變效應(yīng)的Bap和常見抗生素四環(huán)素TC作為污染物質(zhì),以及四環(huán)素抗性基因tetA(C)作為研究對象。本試驗首先建立了 tetA(C)突變基因文庫,并從中篩選出高抗性tetA(C)突變株,再通過測序建立tetA(C)基因突變位點-高抗關(guān)系密碼表。然后設(shè)置不同濃度Bap與TC處理組,培養(yǎng)供試菌株14d,結(jié)合密碼表分析Bap與TC復(fù)合污染與高抗性基因突變株出現(xiàn)概率之間的關(guān)系。最后采取真實環(huán)境中的土壤樣本,分析當(dāng)前Bap、TC污染情況以及四環(huán)素抗性基因突變情況,并分析三者之間可能存在的關(guān)系。本...

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１?ＴＣ在環(huán)境中的遷移途徑??Ｆｉｇ．?１－１?Ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ?ｍｉｇｒａｔｉｏｎ?ｐａｔｈｗａｙｓ?ｉｎ?ｔｈｅ?ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ??

度的抗生素污染（章強ｅｔ?ａｌ．，２０１４），其中污水處理廠和養(yǎng)殖場附近的廢水中抗生??素污染最為嚴重（Ｂｏｘａｌｌ?ｅｔ?ａｌ．，?２００５），另外在被檢測水體中ＴＣ是檢出率最高且濃度最??高的抗生素（Ｃｈｅｎ?ｅｔａｌ．，?２０１４）。??飼料（伴冇抗生素）??ｊｊ?＇［動物....

圖１－２四環(huán)素外排泵的拓撲結(jié)構(gòu)??Ｆｉｇ．?１－２?Ｔｏｐｏｌｏｇｙ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｔｅｔｒａｃｙｃｌｉｎｅ?ｅｆｆｌｕｘ?ｐｕｍｐ??

著增加，其中也包括ＡＲＧｓ突變，而??ＡＲＧｓ突變頻繁發(fā)生會使得微生物產(chǎn)生高抗性的概率也相應(yīng)增加。一旦微生物通過??ＡＲＧｓ突變獲得了高抗性，則當(dāng)環(huán)境中存在亞治療劑量抗生素時，相當(dāng)于增加了微生??物的抗性選擇壓力，高抗性ＡＲＧｓ突變株相較于其他菌株更易于保存下來，并逐漸在??環(huán)境....

圖２－２高保真ＰＣＲ擴增ｔｅｔＡ（Ｃ）基因產(chǎn)物凝膠電泳圖像??Ｆｉｇ．?２－２?Ｇｅｌ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?ｈｉｇｈ?ｆｉｄｅｌｉｔｙ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｅｔＡ（Ｃ）?ｇｅｎｅ??

?四環(huán)素與苯并ａ芘復(fù)合污染對ｔａｔＡ（Ｃ）基因產(chǎn)生高抗性突變的影響???證該質(zhì)粒己導(dǎo)入供試菌株體內(nèi)，圖２－１為凝膠電泳檢測ｔｅｔＡ（Ｃ）基因的結(jié)果，１／２條帶??均顯示為陽性。為進一步驗證該菌株已構(gòu)建成功，對１／２條帶的ｔｅｔＡ（Ｃ）基因片段進行??測序，結(jié)果顯示該基因與標準ｔｅ....

圖２－１常規(guī)ＰＣＲ擴増ｔｅｔＡ（Ｃ）基因凝膠電泳圖像??Ｆｉｇ．?２－１?Ｇｅｌ?ｉｍａｇｅ?ｏｆ?ｇｅｎｅｒａｌ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｅｔＡ（Ｃ）?ｇｅｎｅ??

?四環(huán)素與苯并ａ芘復(fù)合污染對ｔａｔＡ（Ｃ）基因產(chǎn)生高抗性突變的影響???證該質(zhì)粒己導(dǎo)入供試菌株體內(nèi)，圖２－１為凝膠電泳檢測ｔｅｔＡ（Ｃ）基因的結(jié)果，１／２條帶??均顯示為陽性。為進一步驗證該菌株已構(gòu)建成功，對１／２條帶的ｔｅｔＡ（Ｃ）基因片段進行??測序，結(jié)果顯示該基因與標準ｔｅ....

本文編號：3908023