目的提高實(shí)驗(yàn)室對食品中馬源性成分定性鑒定的準(zhǔn)確性和評估檢測人員的專業(yè)技術(shù)水平,增強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室競爭力。方法通過核酸蛋白儀器分析法和單重實(shí)時(shí)熒光PCR法得到樣品真核生物18S rRNA基因擴(kuò)增的循環(huán)閾值,進(jìn)而分析DNA的提取質(zhì)量。再利用標(biāo)準(zhǔn)SN/T 3730.5-2013《食品及飼料中常見畜類品種的鑒定方法第5部分:馬成分檢測實(shí)時(shí)熒光PCR法》,對該標(biāo)準(zhǔn)擴(kuò)增體系的引物探針濃度進(jìn)行優(yōu)化和檢出限分析后,用優(yōu)化的擴(kuò)增體系對樣品進(jìn)行檢測。再依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)SB/T 10923-2012《肉與肉制品中動(dòng)物源性成分的測定實(shí)時(shí)熒光PCR法》的要求,對樣品進(jìn)行檢測。最后對2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的檢測結(jié)果進(jìn)行比對。結(jié)果提取的DNA質(zhì)量符合標(biāo)準(zhǔn)要求。標(biāo)準(zhǔn)SN/T3730.5-2013的引物探針濃度優(yōu)化后,能有效擴(kuò)增陽性樣品,檢出限為0.1%,能有效檢測馬源性成分。2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)檢測20-M805和20-Q719待測樣品,均未檢出馬源性成分。結(jié)論本次能力驗(yàn)證獲得滿意評價(jià)。DNA提取質(zhì)量的評估,反應(yīng)體系中引物探針濃度的優(yōu)化與選擇,不同檢測方法結(jié)果的相互驗(yàn)證和實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量控制都是影響能力驗(yàn)證結(jié)果的重要因素。

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【文章目錄】：
1 引言
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)樣品
        2.1.2 儀器及試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 基因組DNA的提取和真核生物18S r RNA基因的檢測
        2.2.2 標(biāo)準(zhǔn)SN/T 3730.5-2013對馬源性成分的檢測1) SN/T 3730.5-2013標(biāo)準(zhǔn)體系檢測
        2.2.3 標(biāo)準(zhǔn)SB/T 10923-2012對馬源性成分的檢測
        2.2.4 檢驗(yàn)過程質(zhì)量控制
3 結(jié)果與分析
    3.1 DNA提取的質(zhì)量評估
    3.2 標(biāo)準(zhǔn)SN/T 3730.5-2013檢測結(jié)果
        3.2.1 SN/T 3730.5-2013標(biāo)準(zhǔn)體系檢測結(jié)果
        3.2.2 反應(yīng)體系中引物探針濃度的優(yōu)化
        3.2.3 檢出限實(shí)驗(yàn)
        3.2.4 優(yōu)化的引物探針濃度樣品檢測結(jié)果
    3.3 標(biāo)準(zhǔn)SB/T 10923-2012檢測結(jié)果
4 結(jié)論與討論



本文編號：3809054